线粒体凋亡通路在皮质酮(CORT)诱导海马神经元凋亡中的作用

发布时间：2023-02-20 20:22

　　为在细胞水平探讨皮质酮(CORT)诱导HT22细胞凋亡的机制,以模拟冷应激过程中机体分泌的糖皮质激素对海马神经元的作用。试验组HT22细胞用500μmol/L CORT处理3 h,对照组不予处理。用CCK8法检测CORT对HT22细胞活力的影响,Annexin/PI流式细胞术检测细胞凋亡率。为了进一步研究CORT引起的海马神经元凋亡是否是由线粒体凋亡通路介导的,用JC-1探针检测线粒体膜电位的变化,免疫蛋白印迹(Western blot)检测凋亡相关蛋白细胞色素c(Cyt-c)、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果显示,与对照组相比,500μmol/L CORT处理组细胞生存率显著降低,细胞凋亡率显著升高,线粒体膜电位显著下降,Cyt-c、Bax/Bcl-2及活化的Caspase-3表达水平显著升高。结果表明,500μmol/L CORT处理3 h会导致HT22细胞凋亡,并且线粒体凋亡通路在该过程中发挥重要作用。

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞系
    1.2 主要仪器
    1.3 主要试剂
    1.4 HT22细胞的培养
    1.5 CCK8法检测CORT对HT22细胞存活率的影响
    1.6 流式细胞仪检测HT22细胞凋亡情况
    1.7 JC-1探针法检测线粒体膜电位
    1.8 Western blot检测凋亡相关蛋白表达
    1.9 数据统计分析
2 结果
    2.1 CORT对HT22细胞存活率的影响
    2.2 细胞凋亡检测
    2.3 线粒体膜电位检测
    2.4 凋亡相关蛋白表达的检测
3 讨论



本文编号：3747252