高邮鸭、金定鸭胚胎期骨骼肌生长发育的研究
发布时间：2023-03-11 09:21
我国拥有世界上最丰富的家鸭品种资源,养鸭量和消费量均占世界第一。近年来我国鸭肉产量逐步上升,但仍然不能完全满足日益增长的消费需求,养鸭业看似前景广阔,但其存在的问题也较多,其中育种技术水平不高、个体产肉能力不高等问题较为突出,极大地阻碍了肉鸭产业的快速发展。因此,利用先进的育种和分子技术手段提高动物个体的产肉量显得尤为必要。 胚胎期是家禽生长发育无法逾越的重要阶段,这一时期动物肌肉的生长发育对成年家禽的产肉能力影响巨大,通过促进胚胎期骨骼肌生长发育的方法,是提高个体产肉量的最有效的可能方法之一。鉴于禽类胚胎期如此重要的作用,本研究选择了我国地方家鸭品种中成年体重较大、生长速度较快的高邮鸭和体重较小、生长速度较慢的金定鸭为研究素材,来解析它们在胚胎期的相关生长发育指标及骨骼肌生长发育相关基因表达等方面的差异及其原因,并深入研究生肌调节因子(MRFs)、钙蛋白酶3和外源性甲状腺激素(T3)对鸭胚胎期骨骼肌生长发育的作用,以期能在胚胎期发掘与鸭个体产肉量相关的重要基因,为相关遗传改良方法的建立奠定基础理论知识。主要的研究结果如下： 1.利用高邮鸭和金定鸭种蛋进行人工孵化,观察不同时期的胚胎发...
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
本文部分的符号说明
引言
第一章 文献综述
1 我国地方家鸭资源丰富
1.1 高邮鸭品种及其相关研究的概述
1.1.1 基本情况
1.1.2 品种的形成
1.1.3 体型外貌
1.1.4 生产性能与特点
1.1.5 高邮鸭相关科学研究
1.2 金定鸭品种及其相关研究的概述
1.2.1 基本情况
1.2.2 品种的形成
1.2.3 体型外貌
1.2.4 生产性能与特点
1.2.5 金定鸭相关科学研究
2 禽类胚胎期对产肉性能的重要作用
3 肌肉生长发育形成的机制
3.1 肌肉的结构
3.2 肌纤维的分类
3.3 生肌调节因子家族(MRFs)
4 钙蛋白酶
5 甲状腺激素
5.1 甲状腺激素的主要生理作用
5.2 甲状腺激素对肌肉生长发育的作用
6 实时荧光定量PCR技术及其在基因表达中的应用
6.1 实时荧光定量PCR技术的原理与特点
6.2 荧光定量PCR的化学原理
6.2.1 SYBR Green Ⅰ染料法
6.2.2 TaqMan探针法
6.3 实时荧光定量PCR技术的应用
参考文献(一)
第二章 鸭胚胎发育观察及图谱的建立
1 材料和方法
1.1 试验素材
1.2 试验仪器
1.3 孵化条件
1.4 胚胎观察和数据采集
1.5 数据处理与分析
2 结果与分析
2.1 胚胎期胚胎重量变化分析
2.2 胚胎发育观察及图谱的建立
2.2.1 发育早期
2.2.2 发育后期
3 讨论
参考文献(二)
第三章 高邮鸭和金定鸭胚胎期生长发育差异比较
1 材料与方法
1.1 试验材料与孵化方法
1.2 胚蛋的解剖
1.3 数据统计与分析
1.3.1 累积生长
1.3.2 绝对生长
1.3.3 相对生长
1.3.4 分化生长
1.3.5 数据差异比较
2 结果与分析
2.1 高邮鸭胚胎期生长发育性能指标测定及分析
2.1.1 高邮鸭不同胚龄生长发育性能指标测定
2.1.2 高邮鸭不同胚龄生长发育性能指标的变化情况
2.2 金定鸭胚胎期生长发育性能指标测定及分析
2.2.1 金定鸭不同胚龄生长发育性能指标测定
2.2.2 金定鸭不同胚龄生长发育性能指标的变化情况
2.3 高邮鸭和金定鸭重要生长发育性能指标的比较
3 讨论
参考文献(三)
第四章 鸭胚胎期生肌调节因子mRNA表达规律及其与胸腿肌生长发育关系的研究
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂和仪器
1.3 试验方法
1.3.1 总RNA提取和cDNA合成
1.3.2 引物设计、目的片段的克隆
1.3.3 实时荧光定量PCR
1.3.4 标准曲线的建立
1.3.5 数据处理和统计分析
2 结果与分析
2.1 四个基因的Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.1 MyoD基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.2 MyoG基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.3 Myf6基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.4 Myf5基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.2 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中MyoDl基因mRNA表达规律研究
2.2.1 MyoD1基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.2.2 鸭胸肌MyoD1基因mRNA的表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.2.3 MyoD1基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.2.4 鸭腿肌MyoD1基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
2.3 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中MyoG基因mRNA表达规律研究
2.3.1 MyoG基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.3.2 鸭胸肌MyoG基因mRNA表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.3.3 MyoG基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.3.4 鸭腿肌MyoG基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
2.4 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中Myf6基因mRNA表达规律研究
2.4.1 Myf6基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.4.2 鸭胸肌Myf6基因mRNA表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.4.3 Myf6基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.4.4 鸭腿肌Myf6基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
2.5 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中Myf5基因mRNA表达规律研究
2.5.1 Myf5基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.5.2 鸭胸肌Myf5基因mRNA表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.5.3 Myf5基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.5.4 鸭腿肌Myf5基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
3 讨论
3.1 MyoD1基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
3.2 MyoG基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
3.3 Myf6基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
3.4 Myf5基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
参考文献(四)
第五章 鸭胚骨骼肌成肌细胞中生肌调节因子的mRNA表达特性分析
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 主要试剂和仪器
1.3 试验方法
1.3.1 成肌细胞的分离纯化
1.3.2 RNA提取和质量检测
1.3.3 cDNA第一链的合成
1.3.4 引物设计、目的片段的克隆和标准质粒制备
1.3.5 实时荧光定量PCR反应
1.3.6 标准曲线的建立
1.3.7 数据处理和统计分析
2 结果与分析
2.1 鸭胸肌成肌细胞中生肌调节因子的mRNA表达规律
2.2 鸭腿肌成肌细胞中生肌调节因子的mRNA表达规律
3 讨论
参考文献(五)
第六章 外源性甲状腺激素T3对鸭胚胎生长发育及成肌细胞生肌因子表达的影响
1 鸭种蛋内注射T3及胚胎生长发育性能的测定
1.1 材料与方法
1.1.1 鸭种蛋的准备
1.1.2 主要试剂与设备
1.1.3 T3试剂配置
1.1.4 鸭种蛋消毒与锥孔
1.1.5 蛋内注射并封孔
1.1.6 种蛋孵化
1.1.7 凉蛋
1.1.8 鸭生长发育指标测定
1.1.9 血清中T3、T4的测定
1.1.10 数据统计与分析
1.2 T3对成肌细胞中生肌因子mRNA表达量的影响
1.2.1 试验素材
1.2.2 实验试剂与设备
1.2.3 细胞培养与分离
1.2.4 T3干扰
1.2.5 RNA提取
1.2.6 实时荧光定量PCR
1.2.7 数据统计分析
2 结果
2.1 种蛋内注射T3的鸭胚胎期及出生早期生长发育观测
2.2 T3干扰的成肌细胞中生肌因子mRNA表达变化规律
2.2.1 成肌细胞中Myf6基因mRNA表达变化规律
2.2.2 成肌细胞中Myf5基因mRNA表达量的变化规律
2.2.3 成肌细胞中MyoD1基因mRNA表达量的变化规律
3 讨论
3.1 T3对鸭胚胎期和出生后早期生长发育的影响
3.2 T3对鸭胚胎成肌细胞生肌因子mRNA表达的影响
参考文献(六)
第七章 鸭骨骼肌早期发育过程中CAPN3基因表达及其与肌纤维性状的关系
1 材料与方法
1.1 试验动物
1.2 主要试剂和仪器
1.3 肌纤维性状测定
1.4 总RNA提取和cDNA合成
1.5 引物设计、目的片段标准品的制备
1.6 荧光实时定量PCR
1.7 统计分析
2 结果与分析
2.1 肌纤维类型的鉴定和方法的比较
2.2 鸭早期发育过程中肌纤维的发育性变化
2.3 CAPN3基因在不同鸭品种胚胎期和出雏早期胸肌中的表达
2.4 CAPN3基因在不同鸭品种胚胎期和出雏早期腿肌中的表达
3 讨论
3.1 鸭骨骼肌肌纤维类型的鉴别
3.2 CAPN3基因mRNA表达与鸭早期发育中骨骼肌纤维性状的关系
参考文献(七)
第八章 全文结论与创新点
1 全文结论
2 创新点
附录1 鸭胚胎骨骼标本制作方法的建立
附录2 一种分离纯化鸭胚骨骼肌成肌细胞的方法
附录3 一种鉴别鸭骨骼肌中肌纤维类型的方法
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
本文编号：3759617
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
本文部分的符号说明
引言
第一章 文献综述
1 我国地方家鸭资源丰富
1.1 高邮鸭品种及其相关研究的概述
1.1.1 基本情况
1.1.2 品种的形成
1.1.3 体型外貌
1.1.4 生产性能与特点
1.1.5 高邮鸭相关科学研究
1.2 金定鸭品种及其相关研究的概述
1.2.1 基本情况
1.2.2 品种的形成
1.2.3 体型外貌
1.2.4 生产性能与特点
1.2.5 金定鸭相关科学研究
2 禽类胚胎期对产肉性能的重要作用
3 肌肉生长发育形成的机制
3.1 肌肉的结构
3.2 肌纤维的分类
3.3 生肌调节因子家族(MRFs)
4 钙蛋白酶
5 甲状腺激素
5.1 甲状腺激素的主要生理作用
5.2 甲状腺激素对肌肉生长发育的作用
6 实时荧光定量PCR技术及其在基因表达中的应用
6.1 实时荧光定量PCR技术的原理与特点
6.2 荧光定量PCR的化学原理
6.2.1 SYBR Green Ⅰ染料法
6.2.2 TaqMan探针法
6.3 实时荧光定量PCR技术的应用
参考文献(一)
第二章 鸭胚胎发育观察及图谱的建立
1 材料和方法
1.1 试验素材
1.2 试验仪器
1.3 孵化条件
1.4 胚胎观察和数据采集
1.5 数据处理与分析
2 结果与分析
2.1 胚胎期胚胎重量变化分析
2.2 胚胎发育观察及图谱的建立
2.2.1 发育早期
2.2.2 发育后期
3 讨论
参考文献(二)
第三章 高邮鸭和金定鸭胚胎期生长发育差异比较
1 材料与方法
1.1 试验材料与孵化方法
1.2 胚蛋的解剖
1.3 数据统计与分析
1.3.1 累积生长
1.3.2 绝对生长
1.3.3 相对生长
1.3.4 分化生长
1.3.5 数据差异比较
2 结果与分析
2.1 高邮鸭胚胎期生长发育性能指标测定及分析
2.1.1 高邮鸭不同胚龄生长发育性能指标测定
2.1.2 高邮鸭不同胚龄生长发育性能指标的变化情况
2.2 金定鸭胚胎期生长发育性能指标测定及分析
2.2.1 金定鸭不同胚龄生长发育性能指标测定
2.2.2 金定鸭不同胚龄生长发育性能指标的变化情况
2.3 高邮鸭和金定鸭重要生长发育性能指标的比较
3 讨论
参考文献(三)
第四章 鸭胚胎期生肌调节因子mRNA表达规律及其与胸腿肌生长发育关系的研究
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂和仪器
1.3 试验方法
1.3.1 总RNA提取和cDNA合成
1.3.2 引物设计、目的片段的克隆
1.3.3 实时荧光定量PCR
1.3.4 标准曲线的建立
1.3.5 数据处理和统计分析
2 结果与分析
2.1 四个基因的Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.1 MyoD基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.2 MyoG基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.3 Myf6基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.1.4 Myf5基因Real-time PCR扩增曲线、溶解曲线和标准曲线
2.2 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中MyoDl基因mRNA表达规律研究
2.2.1 MyoD1基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.2.2 鸭胸肌MyoD1基因mRNA的表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.2.3 MyoD1基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.2.4 鸭腿肌MyoD1基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
2.3 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中MyoG基因mRNA表达规律研究
2.3.1 MyoG基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.3.2 鸭胸肌MyoG基因mRNA表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.3.3 MyoG基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.3.4 鸭腿肌MyoG基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
2.4 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中Myf6基因mRNA表达规律研究
2.4.1 Myf6基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.4.2 鸭胸肌Myf6基因mRNA表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.4.3 Myf6基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.4.4 鸭腿肌Myf6基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
2.5 胚胎期和出生早期不同鸭品种胸腿肌组织中Myf5基因mRNA表达规律研究
2.5.1 Myf5基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期胸肌组织中的mRNA表达规律
2.5.2 鸭胸肌Myf5基因mRNA表达量与胚重和胸肌重的相关性分析
2.5.3 Myf5基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期和出生早期腿肌组织中的mRNA表达规律
2.5.4 鸭腿肌Myf5基因mRNA表达量与胚重和腿肌重的相关性分析
3 讨论
3.1 MyoD1基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
3.2 MyoG基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
3.3 Myf6基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
3.4 Myf5基因对鸭胚胎期及出生早期胸腿肌生长发育的作用
参考文献(四)
第五章 鸭胚骨骼肌成肌细胞中生肌调节因子的mRNA表达特性分析
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 主要试剂和仪器
1.3 试验方法
1.3.1 成肌细胞的分离纯化
1.3.2 RNA提取和质量检测
1.3.3 cDNA第一链的合成
1.3.4 引物设计、目的片段的克隆和标准质粒制备
1.3.5 实时荧光定量PCR反应
1.3.6 标准曲线的建立
1.3.7 数据处理和统计分析
2 结果与分析
2.1 鸭胸肌成肌细胞中生肌调节因子的mRNA表达规律
2.2 鸭腿肌成肌细胞中生肌调节因子的mRNA表达规律
3 讨论
参考文献(五)
第六章 外源性甲状腺激素T3对鸭胚胎生长发育及成肌细胞生肌因子表达的影响
1 鸭种蛋内注射T3及胚胎生长发育性能的测定
1.1 材料与方法
1.1.1 鸭种蛋的准备
1.1.2 主要试剂与设备
1.1.3 T3试剂配置
1.1.4 鸭种蛋消毒与锥孔
1.1.5 蛋内注射并封孔
1.1.6 种蛋孵化
1.1.7 凉蛋
1.1.8 鸭生长发育指标测定
1.1.9 血清中T3、T4的测定
1.1.10 数据统计与分析
1.2 T3对成肌细胞中生肌因子mRNA表达量的影响
1.2.1 试验素材
1.2.2 实验试剂与设备
1.2.3 细胞培养与分离
1.2.4 T3干扰
1.2.5 RNA提取
1.2.6 实时荧光定量PCR
1.2.7 数据统计分析
2 结果
2.1 种蛋内注射T3的鸭胚胎期及出生早期生长发育观测
2.2 T3干扰的成肌细胞中生肌因子mRNA表达变化规律
2.2.1 成肌细胞中Myf6基因mRNA表达变化规律
2.2.2 成肌细胞中Myf5基因mRNA表达量的变化规律
2.2.3 成肌细胞中MyoD1基因mRNA表达量的变化规律
3 讨论
3.1 T3对鸭胚胎期和出生后早期生长发育的影响
3.2 T3对鸭胚胎成肌细胞生肌因子mRNA表达的影响
参考文献(六)
第七章 鸭骨骼肌早期发育过程中CAPN3基因表达及其与肌纤维性状的关系
1 材料与方法
1.1 试验动物
1.2 主要试剂和仪器
1.3 肌纤维性状测定
1.4 总RNA提取和cDNA合成
1.5 引物设计、目的片段标准品的制备
1.6 荧光实时定量PCR
1.7 统计分析
2 结果与分析
2.1 肌纤维类型的鉴定和方法的比较
2.2 鸭早期发育过程中肌纤维的发育性变化
2.3 CAPN3基因在不同鸭品种胚胎期和出雏早期胸肌中的表达
2.4 CAPN3基因在不同鸭品种胚胎期和出雏早期腿肌中的表达
3 讨论
3.1 鸭骨骼肌肌纤维类型的鉴别
3.2 CAPN3基因mRNA表达与鸭早期发育中骨骼肌纤维性状的关系
参考文献(七)
第八章 全文结论与创新点
1 全文结论
2 创新点
附录1 鸭胚胎骨骼标本制作方法的建立
附录2 一种分离纯化鸭胚骨骼肌成肌细胞的方法
附录3 一种鉴别鸭骨骼肌中肌纤维类型的方法
致谢
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