猪嗜血支原体的猪体感染试验和小鼠感染试验研究

发布时间：2023-03-11 17:11

　　猪嗜血支原体病即猪附红细胞体病(Porcine Eperythrozoonosis, PE)是由猪嗜血支原体(Mycoplasma. suis, M. suis)寄生于红细胞导致的一种热性、急性、溶血性黄疸贫血人兽共患传染病。慢性轻度感染的临床表现多样,从无症状感染到一系列临床症状感染,新生仔猪表现为贫血、温和性黄疸,育肥猪生长迟缓,青年母猪繁殖能力下降。由于急性贫血和慢性持续性感染能够提高呼吸和消化系统疾病的易感性,该病对养猪业造成了严重的经济损失。为了深入研究猪嗜血支原体致病机制,本研究建立了猪嗜血支原体实时荧光定量PCR,阐明了猪嗜血支原体血液中含量和血液动力学之间的相关性。而且,通过感染猪体实验记录了猪嗜血支原体病的临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平、细胞因子变化以及组织病理学等各个方面变化,同时建立了小鼠6种细胞因子的实时荧光定量PCR方法和进行了小鼠的初步感染试验。具体研究内容和结果分为以下3个部分： 1.猪嗜血支原体荧光定量PCR检测方法的建立 根据GenBank发表的猪嗜血支原体16S rRNA基因序列设计合成荧光定量PCR引物,用构建的含16S rRNA...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

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目录
摘要
ABSTRACT
第一篇 文献综述
    第一章 猪嗜血支原体病研究进展
        1 猪嗜血支原体病研究概况
        2 猪嗜血支原体的病原学
            2.1 形态
            2.2 分类
            2.3 分子病原学
        3 猪嗜血支原体病流行病学
            3.1 流行概况
            3.2 传播途径
            3.3 感染宿主
        4 猪嗜血支原体病的临床症状及病理变化
        5 猪嗜血支原体病的血液学研究
        6 猪嗜血支原体病的致病机理
        7 猪嗜血支原体病的诊断
            7.1 猪嗜血支原体病的临床诊断
            7.2 猪嗜血支原体病的实验室诊断
        8 猪嗜血支原体的防治
        9 猪嗜血支原体病动物模型研究
    参考文献
第二篇 试验研究
    第二章 猪嗜血支原体荧光定量PCR检测方法的建立
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 菌种
            1.2 试剂和菌株
            1.3 引物
            1.4 提取猪嗜血支原体DNA
            1.5 荧光定量PCR扩增
            1.6 目的片段的回收和克隆
            1.7 重组质粒的提取
            1.8 重组质粒的酶切鉴定及测序分析
            1.9 荧光定量PCR条件优化
            1.10 熔解曲线分析
            1.11 荧光定量PCR的敏感性和标准曲线的建立
            1.12 实时荧光定量PCR重复性
            1.13 数据分析
        2 结果
            2.1 构建标准阳性质粒
            2.2 实时荧光定量PCR体系的优化
            2.3 实时荧光定量PCR的特异性
            2.4 实时荧光定量PCR的敏感性和标准曲线的建立
            2.5 实时荧光定量PCR的重复性试验
        3 讨论
        ABSTRACT
        参考文献
    第三章 猪嗜血支原体猪体感染试验
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 试剂、菌株和实验动物
            1.2 动物试验及分组
            1.3 菌血症
            1.4 液学和生物化学指标变化
            1.5 抗体和细胞因子
            1.6 病理剖检和组织病理学检查
            1.7 数据分析
        2 结果
            2.1 临床表现
            2.2 体温
            2.3 体重
            2.4 菌血症检测
            2.5 液学和生物化学指标检测
            2.6 猪嗜血支原体血液中含量和血液动力学参数的相关性
            2.7 抗体和细胞因子检测结果
            2.8 组织病理学变化
        3 讨论
        ABSTRACT
        参考文献
    第四章 小鼠细胞因子荧光定量PCR检测方法的建立
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 试剂和菌株以及实验动物
            1.2 细胞因子引物的设计
            1.3 RNA的提取和cDNA的合成
            1.4 脾脏淋巴细胞的分离
            1.5 实时荧光定量PCR
            1.6 目的片段的扩增
            1.7 重组质粒提取
            1.8 酶切鉴定重组质粒及测序分析
            1.9 熔解曲线分析
            1.10 实时荧光定量PCR敏感性和标准曲线的建立
            1.11 实时荧光定量PCR重复性
            1.12 小鼠攻毒试验
            1.13 数据分析
        2 结果
            2.1 构建标准阳性质粒
            2.2 特异性
            2.3 敏感性和标准曲线
            2.4 实时荧光定量PCR的重复性试验
            2.5 小鼠感染试验
        3 讨论
        ABSTRACT
        参考文献
全文总结
致谢



本文编号：3759915