低温诱发肉鸡腹水综合征的分子机制及VC的缓解作用

发布时间：2023-04-01 10:45

　　本文考察了饲粮VC添加对低温诱导条件下肉鸡生长性能、心脏指数、血常规、抗氧化能力、肺血管重构(Pulmonary vascular remodeling, PVR)和缺氧诱导因子-1α (Hypoxia inducible factor-1αa, HIF-1α)等缺氧相关基因表达的影响,在此基础上进一步探索了CoCl2模拟缺氧对肉鸡肺动脉平滑肌细胞(Pulmonary arteries smooth muscle cells, PASMC)中HIF-1α、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)及血管内皮生长因子受体-2(Vascular endothelial growth factor receptor-2, VEGFR-2/Flk-1)基因表达水平的影响,为下一步继续探索VC缓解肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)的分子机制奠定基础。因此,本论文包括两个试验。试验一：低温与饲粮VC添加对1-21d肉鸡机体抗氧化性能、HIF-1α基因表达及肺血管重构的影响选用400只1d科宝肉公鸡,按照初始体重无差异...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
一 前言
二 文献综述
    1 肉鸡腹水综合征研究现状
        1.1 肉鸡AS的发病现状及引发因素
        1.2 肉鸡AS发生的病理机制
            1.2.1 血液动力学
            1.2.2 心脏病理学
            1.2.3 血管重构
            1.2.4 自由基损伤
        1.3 HIF-1α及其信号途径与肉鸡AS
            1.3.1 HIF-1α的结构与功能
            1.3.2 缺氧与HIF-1α
            1.3.3 HIF-1 α与肉鸡AS
    2 VC的抗氧化作用及其对肉鸡AS的调控
三 有待研究的问题、试验目的及意义
    1 有待研究的问题
    2 试验目的及意义
四 试验内容
    试验一：低温与饲粮VC添加对1-21d肉鸡机体抗氧化性能、HIF-1α基因表达及肺血管重构的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验设计
            1.2 试验动物与饲养管理
            1.3 试验饲粮
            1.4 测定指标及方法
                1.4.1 生长性能
                1.4.2 血常规
                1.4.3 心脏指数
                1.4.4 肺动脉血管重构
                1.4.5 抗氧化能力
                1.4.6 肺脏HIF-1α、VEGF和Flk-1mRNA水平
            1.5 数据处理
        2 试验结果与分析
            2.1 肉鸡心脏指数与生长性能
            2.2 温度和VC对肉鸡血常规指标的影响
            2.3 温度和VC对肉鸡抗氧化指标的影响
            2.4 温度和VC对肉鸡肺动脉血管重构的影响
            2.5 温度和VC对肉鸡肺脏HIF-1α、VEGF和Flk-1mRNA水平的影响
            2.6 基因相对表达量和肺动脉重构的相关性
        3 讨论
            3.1 低温与VC对肉鸡AS的影响
            3.2 低温与VC对肉鸡机体氧化及抗氧化能力的影响
            3.3 低温与VC对肉鸡肺动脉血管重构及缺氧相关基因表达水平的影响
        4. 小结
    试验二：COCl₂模拟缺氧对肉鸡肺动脉平滑肌细胞中HIF-1α,VEGF及Flk-1基因表达水平的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验动物
            1.2 细胞培养设备与试剂
            1.3 原代细胞的培养
            1.4 细胞传代培养
            1.5 肺动脉平滑肌细胞的鉴定
                1.5.1 形态观察
                1.5.2 免疫荧光染色
            1.6 检测细胞HIF-1αmRNA相对表达量
                1.6.1 细胞缺氧处理
                1.6.2 细胞中总RNA的提取、反转录为cDNA和Real time-PCR
            1.7 MTT法检测细胞增殖
            1.8 数据处理
        2 试验结果与分析
            2.1 肉鸡肺动脉平滑肌细胞的鉴定
                2.1.1 形态学鉴定
                2.1.2 免疫荧光染色鉴定
            2.2 化学试剂CoCl₂诱导肉鸡肺动脉平滑肌细胞缺氧对HIF-1αmRNA水平及细胞增殖的影响
                2.2.1 HIF-1αmRNA的表达
                2.2.2 细胞增殖
            2.3 细胞中VEGF和Flk-1的基因表达
        3 讨论
            3.1 原代细胞的培养
            3.2 COCl₂诱导缺氧对细胞HIF-1α的影响
            3.3 细胞增殖与基因表达的关系
        4 小结
五 全文讨论与结论
    1 全文讨论
    2 全文结论
六 下一步研究的问题
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的文章



本文编号：3777001