miR-222参与染料木素对C2C12成肌细胞分化的调控作用

发布时间：2023-05-13 09:22

　　染料木素(Genistein),植物雌激素的一种,是一种天然的酪氨酸酶抑制剂,具有抗肿瘤、抗骨质疏松、抗氧化、抗抑郁、调节内分泌和动物生长发育等生物学功能,广泛存在于豆科植物中。作为一种功能型的食物成分,近年来人们在畜牧生产中通过添加染料木素获得了一些积极的效果,但有关其具体作用机制的研究还较少,尤其是染料木素在促进畜禽产肉性能方面的研究鲜见报道。此前相关研究分别独立发现染料木素能够促进或抑制成肌细胞的分化,但其有效作用剂量和调控方式尚不明确。mi RNAs是一类长约22nt的保守的非编码RNA,能够通过与靶基因m RNA的3’-UTR相结合,使其降解或者抑制其转录后翻译。已经有许多mi RNAs被报道与骨骼肌的发育密切相关。本研究以C2C12成肌细胞和小鼠为实验模型,探索染料木素对成肌细胞分化和小鼠骨骼肌发育的影响,以及mi R-222在此过程中所发挥的遗传调控作用。主要研究结果如下:1.给妊娠期母鼠饲喂含染料木素的饲料,在活体内引起骨骼肌组织中mi R-222的下调(P<0.01);同时上调mi R-222的靶基因Myo D(P<0.01)和Myo G(P=0.09)的...

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摘要
Abstract
缩略词
1 文献综述
    1.1 染料木素的研究概述
        1.1.1 染料木素简介
        1.1.2 染料木素的作用机制
        1.1.3 染料木素在动物生产中的应用
    1.2 骨骼肌发育
        1.2.1 胚胎期骨骼肌的发育
        1.2.2 出生后骨骼肌的发育
        1.2.3 骨骼肌发育相关调节因子
    1.3 miRNA对骨骼肌发育的调节
        1.3.1 miRNA的形成及作用机制
        1.3.2 骨骼肌发育相关miRNA
    1.4 miR-222及BTG2概述
        1.4.1 miR-222概述
        1.4.2 BTG2概述
    1.5 本研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物和组织样品收集
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器设备
        2.1.4 细胞和组织总RNA
        2.1.5 引物合成
        2.1.6 质粒、菌株和细胞系
    2.2 实验方法
        2.2.1 生物信息学分析
        2.2.2 RNA提取及检测
        2.2.3 反转录PCR
        2.2.4 定量PCR
        2.2.5 BTG2基因部分3’-UTR真核表达载体构建
        2.2.6 C2C12成肌细胞、Hela细胞的培养
        2.2.7 荧光素酶活性检测
        2.2.8 CCK检测
        2.2.9 细胞免疫荧光染色
    2.3 数据分析与统计方法
3.结果与分析
    3.1 染料木素对小鼠骨骼肌早期发育的影响
    3.2 染料木素对C2C12成肌细胞分化的影响
    3.3 染料木素影响C2C12成肌细胞分化过程中miRNAs的表达
    3.4 miR-222对C2C12成肌细胞分化的影响
        3.4.1 miR-222抑制C2C12成肌细胞分化
        3.4.2 miR-222靶向作用于BTG23’-UTR
        3.4.3 干扰BTG2表达对C2C12成肌细胞分化的影响
    3.5 mi R-222 参与染料木素对 C2C12 成肌细胞分化的调控作用
4.讨论
    4.1 染料木素对小鼠骨骼肌早期发育的影响
    4.2 染料木素对C2C12成肌细胞分化的影响
    4.3 染料木素影响C2C12成肌细胞分化过程中miRNAs的表达
    4.4 miR-222对C2C12成肌细胞分化的调控
    4.5 mi R-222 参与染料木素对 C2C12 成肌细胞分化的调控作用
5 结论
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3815653