益生菌对雏鸡肠道杯状细胞数量及黏蛋白2含量的影响

发布时间：2023-09-02 13:44

　　本研究以1日龄雏鸡为研究对象,采用组织石蜡切片及高碘酸希夫染色法(PAS)和阿利新兰-高碘酸希夫染色法(AB-PAS)、透射电镜法、ELISA法以及荧光定量PCR法对应用益生菌后雏鸡肠道—回肠、盲肠、结肠杯状细胞数量、肠液黏蛋白MUC2含量及肠道MUC2mRNA表达的动态变化进行研究,揭示不同益生菌对雏鸡肠道杯状细胞数量及黏蛋白MUC2含量的影响,为益生菌的研发提供实验依据,降低雏鸡肠道疾病的发病几率。实验结果发现： 1.雏鸡应用益生菌后,其回肠、盲肠、结肠的杯状细胞总数和酸性、双染、中性杯状细胞数量均不同程度高于对照雏鸡,其中,益生菌应用雏鸡回肠、盲肠杯状细胞总数均于饲喂益生菌后1-4天明显高于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01),结肠杯状细胞总数于饲喂益生菌后1-7天明显高于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01)；益生菌应用雏鸡回肠酸性、双染杯状细胞数分别于饲喂益生菌后4天和1～4天明显高于对照雏鸡(P<0.05)；益生菌应用雏鸡盲肠双染杯状细胞数于饲喂益生菌后1-4天明显高于对照雏鸡(P<0.05)；益生菌应用雏鸡结肠酸性、双染杯状细胞数均于...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 益生菌及其研究进展
        1.1.1 益生菌概述
        1.1.2 益生菌的种类及特点
        1.1.3 益生菌的作用机制
        1.1.4 益生菌与动物免疫
    1.2 杯状细胞及其研究进展
        1.2.1 杯状细胞的形态
        1.2.2 杯状细胞的发育
        1.2.3 杯状细胞的分泌功能及调节
        1.2.4 杯状细胞与疾病
        1.2.5 杯状细胞的主要分泌物质
    1.3 MUC2及其研究进展
        1.3.1 MUC2的概述
        1.3.2 MUC2与疾病
    1.4 本研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 菌种
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 益生菌微胶囊的制备
        2.2.2 实验动物分组及其处理
        2.2.3 被检材料采取
        2.2.4 检测指标及方法
    2.3 数据处理
3 结果与分析
    3.1 雏鸡应用益生菌后肠道杯状细胞组织结构和超微结构变化
    3.2 雏鸡应用益生菌后肠道杯状细胞数量变化
        3.2.1 雏鸡应用益生菌后肠道杯状细胞数量变化(PAS染色法)
        3.2.2 雏鸡应用益生菌后肠道杯状细胞数量变化(AB-PAS染色法)
    3.3 雏鸡应用益生菌后肠液中MUC2含量变化
    3.4 雏鸡MUC2 mRNA表达Real Time PCR检测方法的建立及应用
        3.4.1 总RNA质量鉴定
        3.4.2 鸡MUC2及β-actin目的片段RT-PCR扩增电泳结果
        3.4.3 肠道组织MUC2和β-actin mRNA表达
        3.4.4 重组质粒PCR鉴定
        3.4.5 MUC2和β-actin基因扩增片段序列测定
        3.4.6 标准曲线的绘制
        3.4.7 肠道组织MUC2 mRNA表达检测
    3.5 雏鸡应用益生菌后肠道组织MUC2 mRNA表达变化
4 讨论
    4.1 益生菌对雏鸡肠道杯状细胞的形态和数量的影响
        4.1.1 益生菌对雏鸡肠道杯状细胞组织结构及超微结构的影响
        4.1.2 益生菌对雏鸡肠道杯状细胞数量变化的影响
        4.1.3 益生菌对雏鸡肠道杯状细胞分布影响
    4.2 益生菌对雏鸡肠液MUC2蛋白含量及肠道组织MUC2 mRNA表达的影响
        4.2.1 益生菌对雏鸡肠液MUC2含量的影响
        4.2.2 益生菌对肠道组织MUC2 mRNA表达的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3845308