绵马酚抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性及机制研究

发布时间：2023-09-17 09:03

　　由于在人类疾病治疗与畜牧业生产中滥用抗生素,导致了细菌耐药性问题空前严峻。一个典型例子是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)在临床上的分离比例不断增加,给畜禽养殖业带来严重问题。但是目前兽医临床中能够有效治疗MRSA感染的药物却十分有限,因此防治MRSA已经成为当今世界范围内防治畜禽细菌感染的难题和热点。本研究以MRSA标准株(ATCC33591)和临床分离株为研究对象,以筛选具有抗菌活性的中药单体为目标,开展绵马酚抗MRSA的机制研究;以微量肉汤稀释法测定出药物的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),根据MIC和MBC的结果评估绵马酚的动态杀菌效果,绘制其杀菌曲线,确定其发挥最佳药效的浓度与时间;分别通过小鼠败血症致死模型和半致死模型进行保护实验和治疗实验,综合评价绵马酚的体内抗菌活性及效果。结果表明,绵马酚在体内外均具有显著的抗MRSA活性,且达到了万古霉素抗菌效果。同时,我们利用转录组测序技术对绵马酚作用前后MRSA菌株的转录组数据进行比较,并通过荧光定量RT-PCR方法对转录数据进...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)给畜牧业养殖带来的危害
    1.2 国内外治疗动物源MRSA的现状
    1.3 香磷毛蕨素研究概况
        1.3.1 香鳞毛蕨简介
        1.3.2 香鳞毛蕨化学成分
        1.3.3 绵马酚研究概况
第2章 绵马酚抗MRSA体外活性研究
    2.1 实验材料和实验仪器
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 绵马酚对金黄色葡萄球菌敏感菌株和MRSA的抗菌活性
        2.2.2 绵马酚对ATCC33591的杀菌曲线
        2.2.3 绵马酚杀胞内菌实验
        2.2.4 绵马酚作用ATCC33591菌株前后的扫描电子显微镜观察
    2.3 结果
        2.3.1 MIC值和MBC值结果
        2.3.2 杀菌曲线
        2.3.3 绵马酚杀胞内菌活性
        2.3.4 绵马酚作用ATCC33591前后扫描电镜图片
    2.4 小结与讨论
第3章 绵马酚抗MRSA体内活性研究
    3.1 实验材料和实验仪器
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 小鼠败血症致死模型保护实验
        3.2.2 小鼠半致死模型横型治疗实验
    3.3 结果
        3.3.1 小鼠致死与亚致死模型MRSA侵染菌量的确定
        3.3.2 小鼠败血症模型保护实验结果
        3.3.3 小鼠半致死模型治疗数实验结果
        3.3.4 病理学检查
    3.4 小结与讨论
第4章 绵马酚抗MRSA分子作用机制研究
    4.1 实验材料和实验仪器
        4.1.1 实验菌种
        4.1.2 试剂
        4.1.3 主要仪器设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 样品处理
        4.2.2 细菌RNA提取
        4.2.3 高通量转录组测序
        4.2.4 荧光定量PCR
    4.3 结果
        4.3.1 测序数据质量剪切及统计
        4.3.2 差异基因表达的聚类分析
        4.3.3 转录组作用前后ATCC33591转录组表达差异分析
        4.3.4 差异表达基因的GO富集分析
        4.3.5 差异表达基因的KEGG富集分析
        4.3.6 KEGG代谢通路中相关基因作用分析
        4.3.7 荧光定量RT-PCR结果分析
    4.4 小结与讨论
全文结论
参考文献
附录
博士后期间其他工作内容
致谢
作者简介



本文编号：3847419