甲状旁腺素联合BMSCs-3D支架构建物修复犬半月板缺损的研究
发布时间：2023-10-26 20:05
半月板是位于膝关节的纤维软骨组织,具有吸收振荡、分散膝关节承重、减小膝关节摩擦等重要作用。半月板损伤会严重限制膝关节的功能,增加膝关节骨关节炎的风险,而半月板损伤病例很常见。近年来,组织工程为半月板损伤修复治疗提供了一种新的方向。组织工程的主要步骤是首先制备支架,然后将细胞接种于支架上,并通过细胞因子、力学刺激等方法调控细胞-支架复合物,使之产生细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)后移植至动物或人体内。由于半月板解剖结构和生物力学性能上的特殊性,相比其他组织工程支架的制备技术,3D打印技术在制备组织工程半月板支架上有很大优势。骨髓间充质干细胞(Bone marrow stem cells,BMSCs)是理想的半月板组织工程种子细胞的来源,但其在向软骨诱导时常常会发生终末分化。大量研究表明,虽然组织工程半月板移植物可以对关节软骨起到一定保护作用,但依然会造成不同程度的关节软骨损伤及软骨下骨变性,所以,应用组织工程半月板治疗时应关注膝关节软骨损伤和软骨下骨变性。甲状旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH)可以抑制BMSCs向软骨诱导过程中的终末分...
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 半月板的结构与功能
1.1.1 解剖结构和生物力学
1.1.2 半月板细胞外基质
1.1.3 半月板细胞
1.2 半月板损伤及修复重建方法
1.2.1 半月板全部/部分切除术
1.2.2 半月板修复术
1.2.3 同种异体半月板移植
1.2.4 组织工程半月板
1.3 组织工程半月板
1.3.1 组织工程半月板支架
1.3.2 组织工程半月板存在的问题
1.4 甲状旁腺激素(1-34)对膝关节的作用
1.4.1 甲状旁腺激素(1-34)对BMSCs成软骨的作用
1.4.2 甲状旁腺激素(1-34)对关节软骨的作用
1.4.3 甲状旁腺激素(1-34)对软骨下骨的作用
第二章 3D打印支架复合BMSCs制备组织工程半月板及体外成软骨诱导时间对其分化的影响
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 试验试剂与仪器设备
2.2 试验方法
2.2.1 3D打印半月板支架的制备及观察
2.2.2 支架力学性能和降解率的评估
2.2.3 支架与细胞相容性的评估
2.2.4 BMSCs-支架复合物的制备
2.2.5 不同体外诱导时间BMSCs-支架复合物分化生长程度的检测
2.2.6 统计学方法
2.3 试验结果
2.3.1 3D打印支架形态及微观结构观测
2.3.2 支架的力学性能和降解率
2.3.3 支架与细胞的相容性
2.3.4 BMSCs-支架复合物形态学观察
2.3.5 糖胺聚糖(GAG)及DNA含量测定
2.3.6 Western blot检测Ⅱ胶原蛋白的表达情况
2.4 讨论
2.4.1 组织工程半月板支架制备技术的选择
2.4.2 组织工程化半月板体外诱导培养时间的选择
第三章 PTH(1-34)对BMSCs-3D打印支架构建体修复犬半月板缺损的影响
3.1 试验材料
3.1.1 试验动物
3.1.2 试验试剂与药品
3.1.3 试验仪器与耗材
3.2 试验方法
3.2.1 组织工程化半月板的构建
3.2.2 手术步骤
3.2.3 大体观察及膝关节功能评分
3.2.4 剖检观察
3.2.5 新生半月板的生物力学检测
3.2.6 组织学观察及评分
3.2.7 统计学方法
3.3 试验结果
3.3.1 大体观察及膝关节功能评分
3.3.2 剖检观察结果
3.3.3 新生半月板的生物力学检测结果
3.3.4 新生半月板组织学观察结果
3.3.5 股骨髁和胫骨平台组织学观察结果
3.4 讨论
3.4.1 模型动物的选择
3.4.2 BMSCs-3D打印支架构建体修复半月板缺损及PTH(1-34)的辅助作用
第四章 结论
参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3856896
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 半月板的结构与功能
1.1.1 解剖结构和生物力学
1.1.2 半月板细胞外基质
1.1.3 半月板细胞
1.2 半月板损伤及修复重建方法
1.2.1 半月板全部/部分切除术
1.2.2 半月板修复术
1.2.3 同种异体半月板移植
1.2.4 组织工程半月板
1.3 组织工程半月板
1.3.1 组织工程半月板支架
1.3.2 组织工程半月板存在的问题
1.4 甲状旁腺激素(1-34)对膝关节的作用
1.4.1 甲状旁腺激素(1-34)对BMSCs成软骨的作用
1.4.2 甲状旁腺激素(1-34)对关节软骨的作用
1.4.3 甲状旁腺激素(1-34)对软骨下骨的作用
第二章 3D打印支架复合BMSCs制备组织工程半月板及体外成软骨诱导时间对其分化的影响
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 试验试剂与仪器设备
2.2 试验方法
2.2.1 3D打印半月板支架的制备及观察
2.2.2 支架力学性能和降解率的评估
2.2.3 支架与细胞相容性的评估
2.2.4 BMSCs-支架复合物的制备
2.2.5 不同体外诱导时间BMSCs-支架复合物分化生长程度的检测
2.2.6 统计学方法
2.3 试验结果
2.3.1 3D打印支架形态及微观结构观测
2.3.2 支架的力学性能和降解率
2.3.3 支架与细胞的相容性
2.3.4 BMSCs-支架复合物形态学观察
2.3.5 糖胺聚糖(GAG)及DNA含量测定
2.3.6 Western blot检测Ⅱ胶原蛋白的表达情况
2.4 讨论
2.4.1 组织工程半月板支架制备技术的选择
2.4.2 组织工程化半月板体外诱导培养时间的选择
第三章 PTH(1-34)对BMSCs-3D打印支架构建体修复犬半月板缺损的影响
3.1 试验材料
3.1.1 试验动物
3.1.2 试验试剂与药品
3.1.3 试验仪器与耗材
3.2 试验方法
3.2.1 组织工程化半月板的构建
3.2.2 手术步骤
3.2.3 大体观察及膝关节功能评分
3.2.4 剖检观察
3.2.5 新生半月板的生物力学检测
3.2.6 组织学观察及评分
3.2.7 统计学方法
3.3 试验结果
3.3.1 大体观察及膝关节功能评分
3.3.2 剖检观察结果
3.3.3 新生半月板的生物力学检测结果
3.3.4 新生半月板组织学观察结果
3.3.5 股骨髁和胫骨平台组织学观察结果
3.4 讨论
3.4.1 模型动物的选择
3.4.2 BMSCs-3D打印支架构建体修复半月板缺损及PTH(1-34)的辅助作用
第四章 结论
参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3856896
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