1型鸭甲肝病毒（DHAV-1）致雏鸭肝损伤机制的研究

发布时间：2023-10-31 19:17

　　鸭病毒性肝炎是由1型鸭甲肝病毒(DHAV-1)引起雏鸭的一种急性高度接触性传染病,主要侵害3周龄以内的雏鸭,特别是1周龄以内的雏鸭最易感,病死率达90%以上。虽然近两年DHAV-1的全基因序列公布于世使得DVH得到了人们的关注,国内众多研究者的注意力集中在病原学的研究,而对于DVH的发病机制的研究仍局限在上世纪的组织学和血清学水平。自然感染DHA-V与日龄有关,1-2周龄是发病的高峰期。我们前期研究已经证实4日龄的雏鸭人工感染DHAV-1后1-2天急性死亡,而35日龄的大鸭仅见一过性的精神沉郁。35日龄鸭为什么不发病,除了与免疫系统发育不完善以外,是不是与鸭肝脏发育相关,国内外对不同品种的8周龄以上鸭的肥肝发生机制研究的较多,而对于35日龄以下肉鸭肝脏脂代谢还未见报道。本课题第一部分拟对3—35日龄鸭的脂肪代谢规律进行动态的研究。其次雏鸭感染DHAV-1后快速死亡与急性肝损伤及其导致的低血糖昏迷或肝性脑病密切相关。因此本研究第二部分以临床分离的DHAV-1JX株感染动物模型,研究病毒感染后,肝脏脂质过氧化、脂代谢相关调控基因和炎症因子的改变,从而阐明鸭肝炎病毒致雏鸭肝损伤的机制。 1....

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 文献综述
    1 鸭病毒性肝炎概述
        1.1 鸭肝炎病毒分型
        1.2 鸭病毒性肝炎的发病特点
        1.3 鸭病毒性肝炎的发病机制研究现状
    2 肝损伤的研究进展
        2.1 鸭肝脂代谢
        2.2 脂质过氧化与肝损伤
        2.3 自由基与肝损伤
        2.4 细胞因子与肝损伤
        2.5 低血糖与肝性昏迷
    3 课题意义及研究思路
第二章 3-35日龄樱桃谷肉鸭肝脂肪代谢的变化
    1 材料
        1.1 试验动物及营养要求
        1.2 主要仪器设备
        1.3 主要试剂及配置
    2 试验方法
        2.1 试验设计及取材
        2.2 肝脏粗脂肪测定方法-索氏抽提法
        2.3 清生化指标的测定
        2.4 冰冻切片的制作
        2.5 肝组织油红O染色
        2.6 石蜡切片的制作和HE染色
        2.7 免疫组织化学染色
        2.8 数据分析
    3 实验结果
        3.1 不同日龄肉鸭肝脏内粗脂肪的含量的测定结果
        3.2 不同日龄肉鸭血浆脂代谢指标的测定结果
        3.3 不同日龄肉鸭肝组织内中性脂肪含量变化
        3.4 不同日龄肉鸭肝组织组织学观察
        3.5 不同日龄肉鸭肝组织内脂代谢相关调控蛋白的含量变化
    4 讨论
        4.1 不同日龄肉鸭肝脏的组织学特点和肝脏内脂质含量的变化
        4.2 不同日龄肉鸭血浆脂代谢的特点
        4.3 FABP、PPAR、MTP在肉鸭生长期肝脂代谢的可能作用
    5 结论
第三章 鸭病毒性肝炎对樱桃谷肉鸭的肝损伤机制
    1 材料
        1.1 病毒、试验动物及营养要求
        1.2 主要仪器设备
        1.3 主要试剂及配置
    2 试验方法
        2.1 病毒的增殖
        2.2 试验设计及取材
        2.3 肝匀浆的制备
        2.4 清生化指标的测定
        2.5 肝组织自由基相关指标的测定
        2.6 石蜡切片的制作和HE染色
        2.7 免疫组织化学染色
        2.8 肝组织RNA提取和cDNA合成
        2.9 实时荧光定量PCR检测肝组织中的病毒含量
        2.10 实时荧光定量PCR检测肝组织细胞因子的表达
        2.11 血清内细胞因子IL-1β和IL-6 ELISA测定
        2.12 数据分析
    3 实验结果
        3.1 DHAV-1感染雏鸭后临床症状和病理剖检变化
        3.2 DHAV-1感染雏鸭肝脏的组织学动态观察
        3.3 DHAV-1感染雏鸭后血液内胆红素的动态变化
        3.4 DHAV-1感染雏鸭后血浆内肝损伤相关酶的动态变化
        3.5 DHAV-1感染雏鸭后脂代谢指标的动态变化
        3.6 DHAV-1感染雏鸭后肝组织中NOS和NO的变化规律
        3.7 DHAV-1感染雏鸭后肝组织中抗氧化酶的变化规律
        3.8 DHAV-1感染雏鸭后血氨和血糖的动态变化
        3.9 DHAV-1感染雏鸭后PPAR在肝组织中的分布规律
        3.10 DHAV-1感染雏鸭后MTP在肝组织中的分布规律
        3.11 DHAV-1感染雏鸭肝组织中病毒含量的动态变化
        3.12 DHAV-1感染雏鸭后血液内细胞因子的动态变化
        3.13 DHAV-1感染雏鸭后肝脏内细胞因子的转录
        3.14 DHAV-1感染雏鸭后肝脏内PPARa的转录
    4 讨论
        4.1 DHAV-1感染雏鸭后代谢异常与肝损伤的关系
        4.2 DHAV-1感染雏鸭后肝内自由基与肝损伤的关系
        4.3 细胞因子参与DHAV-1感染后雏鸭肝损伤的机制
    5 结论
参考文献
博士期间发表与研究相关的论文
致谢



本文编号：3859323