Ghrelin对体外牛卵丘细胞增殖和卵母细胞成熟影响的研究
发布时间：2023-11-12 13:55
哺乳动物中，Ghrelin被发现是一种协调能量和生殖活动平衡的促进食欲的胃肠激素，是生长激素促分泌物受体(Growth hormone secretagogue receptor，GHS-R)的内源性配体，主要在胃组织内分泌细胞中分布。近年，在生殖系统中发现Ghrelin的高表达，有力的证明Ghrelin在生殖系统中有着比较重要的位置。卵母细胞的成熟与发育是哺乳动物进行体外受精及胚胎发育的先决条件，但是，卵母细胞成熟过程受到多重因素的影响。Ghrelin作为近年发现的新型激素，在一定程度上影响着生殖系统。因此，探索Ghrelin在卵母细胞成熟过程中的潜在作用对于促进体外受精等相关胚胎工程技术的发展和应用有着重要的理论与实践指导意义。 研究表明Ghrelin和GHS-R主要在卵巢具有分泌类固醇的黄体细胞和间隙细胞中表达，在卵母细胞中也有Ghrelin和其受体的表达。而且Ghrelin在体外刺激颗粒细胞增殖和抑制其凋亡而促进卵泡发育，并且抑制卵母细胞成熟。Ghrelin是否参与牛卵母细胞成熟，是否可以促进牛卵丘细胞增殖，未见报道。本研究以牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)为研究对象，运用免疫...
【文章页数】：121 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 引言
1.1 概述
1.2 生长激素促分泌素(GHS)和其受体(GHS-R)的发现
1.3 Ghrelin 的鉴定和纯化
1.3.1 Ghrelin 的纯化和结构
1.3.2 哺乳动物的 Ghrelin
1.3.3 Ghrelin 和促胃动素
1.3.4 Ghrelin 的基因和结构
1.3.5 非哺乳类动物的 Ghrelin
1.4 Ghrelin 的分布
1.4.1 Ghrelin 浓度的测定
1.4.2 Ghrelin 在胃和肠道中的分布
1.4.3 Ghrelin 在脑和垂体中的分布
1.4.4 Ghrelin 生成细胞
1.5 Ghrelin 受体
1.5.1 Ghrelin 受体类型
1.5.2 Ghrelin 受体的信号通路
1.5.3 Ghrelin 受体的分布
1.6 Ghrelin 的生理功能
1.6.1 GH 释放功能
1.6.2 调节食欲
1.6.3 调节胃肠作用
1.6.4 心血管作用
1.6.5 GHrelin 和胰岛素分泌
1.7 Ghrelin 与生殖
1.7.1 Ghrelin 对生殖系统调节作用的研究现状
1.7.2 Ghrelin 与雌性生殖
1.7.3 Ghrelin 调控细胞的机理研究现状
1.7.4 Ghrelin 对卵母细胞成熟和颗粒细胞发育的研究现状
1.7.5 研究问题的提出
1.7.6 实验设计
2 牛卵母细胞及卵丘细胞 Ghrelin 和 Ghrelin Receptor 的表达
2.1 牛卵母细胞及卵丘细胞 Ghrelin 和 Ghrelin Receptor 蛋白的表达
2.1.1 材料与方法
2.1.2 结果
2.1.3 讨论
2.2 体外自然成熟过程中卵母细胞及卵丘细胞中 Ghrelin 和 GHS-R1a mRNA 的表达变化
2.2.1 材料和方法
2.2.2 结果
2.2.3 讨论
2.3 小结
3 FSH 对体外成熟培养卵母细胞和卵丘细胞 Ghrelin 和 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.1 材料和方法
3.1.1 仪器和试剂
3.1.2 牛卵母细胞和卵丘细胞的收集
3.1.3 卵母细胞和卵丘细胞实时定量 RT-PCR 检测
3.1.4 实验数据统计方法
3.2 结果
3.2.1 FSH 对卵母细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.2.2 FSH 对卵丘细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.3 讨论
3.3.1 FSH 对卵母细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.3.2 FSH 对卵丘细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.4 小结
4 Ghrelin 和[D-Lys3]-GHRP-6 对卵丘细胞体外增殖的影响
4.1 [D-Lys3]-GHRP-6 对卵丘细胞体外增殖的影响
4.1.1 材料和方法
4.1.2 结果
4.1.3 讨论
4.2 Ghrelin 对卵丘细胞体外增殖的影响
4.2.1 材料和方法
4.2.2 结果
4.2.3 讨论
4.2.4 小结
5 Ghrelin 和[D-Lys3]-GHRP-6 对卵母细胞体外成熟的影响
5.1 材料和方法
5.1.1 仪器和试剂
5.1.2 牛卵母细胞的获得
5.1.3 RNA 提取
5.1.4 实时荧光 PCR 反应引物
5.1.5 实时 RT-PCR 反应
5.1.6 牛卵母细胞核成熟的判定
5.1.7 实验数据统计方法
5.2 结果
5.2.1 FSH 和[D-Lys3]-GHRP-6 对卵母细胞 BMP15 和 GDF9 mRNA 相对表达的影响
5.3 讨论
5.4 小结
6 结论
致谢
参考文献
作者简介
附：博士期间参与发表论文
本文编号：3863289
【文章页数】：121 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 引言
1.1 概述
1.2 生长激素促分泌素(GHS)和其受体(GHS-R)的发现
1.3 Ghrelin 的鉴定和纯化
1.3.1 Ghrelin 的纯化和结构
1.3.2 哺乳动物的 Ghrelin
1.3.3 Ghrelin 和促胃动素
1.3.4 Ghrelin 的基因和结构
1.3.5 非哺乳类动物的 Ghrelin
1.4 Ghrelin 的分布
1.4.1 Ghrelin 浓度的测定
1.4.2 Ghrelin 在胃和肠道中的分布
1.4.3 Ghrelin 在脑和垂体中的分布
1.4.4 Ghrelin 生成细胞
1.5 Ghrelin 受体
1.5.1 Ghrelin 受体类型
1.5.2 Ghrelin 受体的信号通路
1.5.3 Ghrelin 受体的分布
1.6 Ghrelin 的生理功能
1.6.1 GH 释放功能
1.6.2 调节食欲
1.6.3 调节胃肠作用
1.6.4 心血管作用
1.6.5 GHrelin 和胰岛素分泌
1.7 Ghrelin 与生殖
1.7.1 Ghrelin 对生殖系统调节作用的研究现状
1.7.2 Ghrelin 与雌性生殖
1.7.3 Ghrelin 调控细胞的机理研究现状
1.7.4 Ghrelin 对卵母细胞成熟和颗粒细胞发育的研究现状
1.7.5 研究问题的提出
1.7.6 实验设计
2 牛卵母细胞及卵丘细胞 Ghrelin 和 Ghrelin Receptor 的表达
2.1 牛卵母细胞及卵丘细胞 Ghrelin 和 Ghrelin Receptor 蛋白的表达
2.1.1 材料与方法
2.1.2 结果
2.1.3 讨论
2.2 体外自然成熟过程中卵母细胞及卵丘细胞中 Ghrelin 和 GHS-R1a mRNA 的表达变化
2.2.1 材料和方法
2.2.2 结果
2.2.3 讨论
2.3 小结
3 FSH 对体外成熟培养卵母细胞和卵丘细胞 Ghrelin 和 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.1 材料和方法
3.1.1 仪器和试剂
3.1.2 牛卵母细胞和卵丘细胞的收集
3.1.3 卵母细胞和卵丘细胞实时定量 RT-PCR 检测
3.1.4 实验数据统计方法
3.2 结果
3.2.1 FSH 对卵母细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.2.2 FSH 对卵丘细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.3 讨论
3.3.1 FSH 对卵母细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.3.2 FSH 对卵丘细胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表达的影响
3.4 小结
4 Ghrelin 和[D-Lys3]-GHRP-6 对卵丘细胞体外增殖的影响
4.1 [D-Lys3]-GHRP-6 对卵丘细胞体外增殖的影响
4.1.1 材料和方法
4.1.2 结果
4.1.3 讨论
4.2 Ghrelin 对卵丘细胞体外增殖的影响
4.2.1 材料和方法
4.2.2 结果
4.2.3 讨论
4.2.4 小结
5 Ghrelin 和[D-Lys3]-GHRP-6 对卵母细胞体外成熟的影响
5.1 材料和方法
5.1.1 仪器和试剂
5.1.2 牛卵母细胞的获得
5.1.3 RNA 提取
5.1.4 实时荧光 PCR 反应引物
5.1.5 实时 RT-PCR 反应
5.1.6 牛卵母细胞核成熟的判定
5.1.7 实验数据统计方法
5.2 结果
5.2.1 FSH 和[D-Lys3]-GHRP-6 对卵母细胞 BMP15 和 GDF9 mRNA 相对表达的影响
5.3 讨论
5.4 小结
6 结论
致谢
参考文献
作者简介
附：博士期间参与发表论文
本文编号：3863289
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