绿色气球菌噬菌体AVP与其裂解酶的生物学特性及对小鼠乳腺炎模型的实验性治疗

发布时间：2024-04-23 22:37

　　绿色气球菌(Aerococcus viridans)为革兰氏阳性球菌,是一种重要的人畜共患病原菌,在环境中普遍存在,可以引起人和动物的多种感染甚至死亡。在兽医临床上,绿色气球菌可引起猪的脑膜炎、肺炎、尿路感染和关节炎等,此外,该菌还可引起牛临床和亚临床乳腺炎。但由于该菌与肠球菌和链球菌的形态及生化特征很相似,所以前期绿色气球菌多被误判为这两种细菌。近年来,由于鉴定方法的完善,越来越多的绿色气球菌被分离鉴定,且由于抗生素的长期不规范使用导致耐药菌株的不断出现,使该菌引起感染的治疗难度不断加大。噬菌体能够特异性的感染并杀死细菌,因此可作为细菌(特别是耐药性细菌)感染治疗的候选药物。噬菌体疗法是一种十分有前景的可以辅助甚至替代抗生素的候选疗法。目前,绿色气球菌感染的控制仍是以抗生素为主,尚未见其噬菌体及其用于感染治疗的相关报道。本研究首先从临床发病的猪场及奶牛场等分离并鉴定了14株绿色气球菌。以绿色气球菌AV-X1作为宿主菌,从污水中分离到首个感染绿色气球菌的噬菌体,并按照标准命名法将其命名为vB_AviM_AVP(简称AVP)。对其基本生物学特性做进...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.3细菌对裂解酶AVPL的抗性

结果（图3.3）表明,连续传代7代后,宿主菌仍对AVPL保持敏感性（P>0.05）,表明连续传代7代细菌不会对AVPL产生抗性。3.3.4AVPL在牛奶中的活性

图3.4裂解酶AVPL在牛奶中活性的测定

选用一株牛乳腺炎分离株测定了裂解酶AVPL在巴氏杀菌牛奶中的裂解活性。结果如图3.4所示,AVPL在牛奶中具有很好的杀菌活性,不受牛奶中物质的影响,终浓度12.5μg/mL的AVPL即可使2×106CFU的菌在3h内全部裂解,这体现了AVPL高效的裂解活性。3.3.5A....

图3.5AVPL的催化域与LysGH15的Amidase结构域结构比对（A）和AVPL的催化域3D结构示意图（B）

通过与PDB中已公布结构的蛋白进行比对分析,表明AVPL的催化区与金黄色葡萄球菌裂解酶LysGH15的Amidase结构域虽然氨基酸序列差异较大,但在3D结构上高度相似。因此以LysGH15的Amidase结构域的3D结构为模板,利用Phyre2软件预测得到了置信度为100%的A....

图3.6AVPL催化域和LysGH15的Amidase结构域的序列比对

为了确定AVPL催化域的关键作用位点,将AVPL和LysGH15的Amidase结构域的氨基酸序列进行比对和分析。结果显示38%的AVPL序列（主要是催化区）和LysGH15的Amidase结构域的序列同源性较高（见图3.6）。并根据Amidase的活性位点,预测99E、159H....

本文编号：3962852