猪肠外致病性大肠杆菌分离鉴定及双基因缺失突变株构建

发布时间：2024-05-30 23:06

　　大肠埃希氏菌(Escherichia Coli,E.Coli)通常称为大肠杆菌,学术界根据其临床致病性将其分为三类：共生型大肠杆菌,肠内致病性大肠杆菌,肠外致病性大肠杆菌。 共生型大肠杆菌与宿主是互利共生的关系,并伴随其终生,经粪便散播到周围环境中,一般不致病；肠内致病性大肠杆菌广泛存在于少数宿主的肠道内和环境中,机体免疫功能正常时一般不会引起肠道外的感染,但免疫力低下时会出现肠道外的感染；肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia Coli,ExPEC)可使不同的宿主发生泌尿道感染(UPEC)、脑膜炎(NMEC)、败血症(Septicemia)、肺炎(Pneumonia)、腹膜炎(Pleurisy)及其它肠外软组织感染(Soft Tissue Infections),因此受到医学界普遍关注,ExPEC与其他病菌的混合感染,给养殖业造成了巨大的经济损失。 基于以上所述肠外致病性大肠杆菌的危害我们开展了本实验,旨在通过对临床分离的肠外致病性大肠杆菌进行研究,掌握ExPEC的流行病学规律,为该病的诊断与防治打下基础；另外开展了猪源肠外致...

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摘要
Abstract
英文縮略词表
1 文献综述
    1.1 大肠杆菌危害
    1.2 大肠杆菌病原学
        1.2.1 生理生化特性
        1.2.2 流行病学
    1.3 大肠杆菌致病机制
    1.4 大肠杆菌防治
        1.4.1 药物防治
        1.4.2 疫苗防治
2 研究目的与意义
3 材料及方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 病料、菌株和培养条件
        3.1.2 试剂及主要仪器
        3.1.3 培养基及主要溶液的配制
        3.1.4 试验动物
    3.2 实验方法
        3.2.1 分菌鉴定
        3.2.2 基因工程疫苗的研制
4 结果与分析
    4.1 分离鉴定试验结果
        4.1.1 培养特性
        4.1.2 PCR鉴定结果
        4.1.3 毒力基因检测
        4.1.4 PCR分群试验结果
        4.1.5 药物敏感试验结果
    4.2 重组自杀性质粒pREΔiucb的构建
        4.2.1 iucB基因上下游片段的扩增
        4.2.2 质粒pSKΔiucB的构建
        4.2.3 质粒pREΔiucB的构建
    4.3 缺失株的筛选和鉴定
    4.4 突变株生长特性的研究
    4.5 缺失菌株对小鼠的毒力试验及LD50的测定
5 讨论
    5.1 ExPEC流行病学
        5.1.1 流行规律
        5.1.2 PCR分群
        5.1.3 药敏试验
    5.2 ExPEC双基因缺失株的构建
        5.2.1 基因工程疫苗
        5.2.2 靶位基因的选择
        5.2.3 重组自杀性质粒的构建
        5.2.4 基因缺失株的筛选鉴定
        5.2.5 基因缺失株的生物学培养特性
        5.2.6 展望
6 结论
参考文献
致谢



本文编号：3984814