广西巴马小型猪PERV全基因扩增与分析及cDNA克隆的构建

发布时间：2024-12-07 02:56

　　使用猪源器官进行异种移植被认为是解决当前人源供体器官短缺,治疗终末期器官疾病的有效方法之一。而广西巴马小型猪是采用闭锁纯繁近交方式选育的广西地方特有的小型猪品种,是一种遗传稳定,性状优良的实验动物,可作为异种移植的理想器官供体。但是,由于广西巴马小型猪体内普遍存在猪内源性逆转录病毒(Porcine endogenous retrovirus, PERV),能够以前病毒DNA形式整合进宿主细胞基因组中,并随细胞染色体复制而复制。PERV在体外可以感染多种人源细胞的发现,引起了人们对异种移植安全性的广泛关注。因此,有必要开展广西巴马小型猪PERV的基础研究,了解其感染机制,以评估PERV的病原安全性。 本研究采用PCR技术,扩增获得4条覆盖广西巴马小型猪PERV全基因的重叠片段,经拼接获得1条完整的广西巴马小型猪PERV (PERV-BM)全基因序列,大小为8774bp。遗传进化分析表明PERV-BM属于PERV A亚型；序列分析发现,PERV-BM的5'UTR的启动子和增强子区域分别位于400-467bp与313-432bp位置；对推导氨基酸序列分析则发现病毒的env蛋白中含有15个可...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1PERV病毒粒子结构示意图

为棒状或球状，由蛋白质和螺旋状的核糖核酸组成[ia5]。构由外向内依次为：外膜（Outerenvelope)，包括表面蛋白（SU)和穿内膜（Innermembrane)，为衣壳蛋白（Capsidprotein);最内层为病毒核(图1)。

图2FEAV基因组结构

广西大学硕士学位论文 广西巴马<N型猪PERV全基因扩增与序列分析及cDNA克隆的构建以及其它物种细胞；不是所有猪的基因组中都携带PERV-C，因其具有嗜亲性，所以仅能感染猪源细胞。逆转录酶为PERV最重要的酶，PERV感染宿主后，在逆转录酶的作用下以病毒RNA为模板逆转录合成前....

图3PERV感染模式图

图3PERV感染模式图Fig.3PatterningofPERVinfectionERV最早是由Armstrong等[46]于1971年在PK-15细胞上发现的。在此之后，nig和？[37丨6[等[47，48]从猪淋巴瘤细胞系以及经福射诱导的猪白血病细胞中第一次分PE....

图4抗PERV复制的细胞?限制因子作用模式图

(ApolipoproteinBmRNA-editingcatalyticpolypeptides,APOBEC)具有胞嘧唆脱氨酶活性，能破坏病毒DNA的合成[79’81"?3](图4)。对这些抗病毒因子进行研究，有助于抗PERV药物的研发，为提高异种移植的安全性提供....

本文编号：4014682