Wnt/β-catenin信号通路在禽类干细胞向脂肪细胞分化中的作用
发布时间：2024-12-11 00:02
畜禽遗传资源是我国的宝贵财富,是畜牧行业相当重要的生产资料,遗传资源的保护与保存对于促进畜牧业的可持续发展,保证自然界物种多样性以及遗传多态性具有重要的意义,利用储存干细胞的方法保存遗传资源,也是为畜禽遗传资源的保护和利用开辟了新思路。本实验以禽类间充质干细胞为实验材料,对间充质干细胞进行了分离、培养及生物学特性分析和多向分化潜能的研究。畜禽的脂肪细胞分化过程是由间充质干细胞分化为前脂肪细胞,再分化为脂肪细胞。本文通过对Wnt/β-catenin信号通路在肉鸡脂肪干细胞向脂肪细胞诱导过程中的作用做了分析,得到以下结果:1.利用Ⅰ型胶原酶分离肉鸡脂肪干细胞(ADSCs),培养形态呈长梭形,是典型的间充质细胞的形态,在体外条件培养了28代。绘制P3、P15和P25肉鸡ADSCs的生长曲线检测其增殖的能力,共经历了潜伏期、对数期、稳定期以及衰亡期,呈典型的“S”形生长,随着代次的升高,细胞的增殖能力逐渐减弱。同样,细胞克隆形成能力实验结果表明,肉鸡ADSCs具有自我更新能力,但随着代次的增高,自我更新能力将会减弱。利用RT-PCR和免疫荧光检测细胞的表面标记物,再通过流式细胞仪分析其表面标记物...
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
1.1 我国畜禽遗传资源现状
1.2 间充质干细胞相关研究
1.2.1 干细胞及其分类
1.2.2 间充质干细胞及其表面抗原的表达
1.2.3 间充质干细胞的形态
1.2.4 间充质干细胞的免疫调节功能
1.2.5 间充质干细胞的多向分化潜能
1.3 脂肪干细胞的研究进展
1.4 真皮间充质干细胞的研究进展
1.5 Wnt信号通路的研究进展及其对脂肪细胞形成的影响
1.5.1 Wnt/β-catenin通路介绍
1.5.2 Wnt/β-catenin通路在脂肪细胞分化中的作用
1.6 研究的目的和意义
第二章 肉鸡脂肪干细胞的分离、培养以及生物学特性的研究
2.1 实验材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验主要的试剂及配制
2.1.3 实验主要的设备及仪器
2.2 实验方法
2.2.1 肉鸡ADSCs分离与培养
2.2.2 肉鸡ADSCs生物学特性鉴定
2.2.3 肉鸡ADSCs三向分化潜能的研究
2.2.4 统计方法
2.3 实验结果
2.3.1 肉鸡ADSCs形态学观察
2.3.2 肉鸡ADSCs生长曲线的绘制
2.3.3 肉鸡ADSCs克隆形成能力检测
2.3.4 肉鸡ADSCs的 RT-PCR检测
2.3.5 肉鸡ADSCs的免疫荧光检测
2.3.6 肉鸡ADSCs的表面标记物阳性率检测
2.3.7 肉鸡ADSCs的诱导分化能力的检测
2.4 讨论
第三章 鹅真皮间充质干细胞的分离、培养以及生物学特性的研究
3.1 实验材料与方法
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验主要的试剂及配制
3.1.3 实验主要的设备及仪器
3.2 实验方法
3.2.1 鹅DMSCs分离与培养
3.2.2 鹅DMSCs生物学特性鉴定
3.2.3 鹅DMSCs三向分化潜能的研究
3.2.4 鹅DMSCs与肉鸡ADSCs成脂分化能力的比对
3.3 实验结果
3.3.1 鹅DMSCs形态学观察
3.3.2 鹅DMSCs生长曲线的绘制
3.3.3 鹅DMSCs克隆形成能力的检测
3.3.4 鹅DMSCs的 RT-PCR检测
3.3.5 鹅DMSCs的免疫荧光检测
3.3.6 流式细胞术分析鹅DMSCs标记物阳性率
3.3.7 鹅DMSCs的诱导分化及鉴定
3.3.8 鹅DMSCs与肉鸡ADSCs成脂分化能力的比对
3.4 讨论
第四章 Wnt信号通路在禽类干细胞向脂肪细胞分化的作用
4.1 实验材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验主要的试剂及配制
4.1.3 实验主要的设备及仪器
4.1.4 实验方法
4.2 实验结果
4.2.1 Wnt/β-catenin信号通路各因子的蛋白表达量
4.2.2 细胞形态学观察以及油红O染色结果
4.2.3 成脂分化过程PPARγ和C/EBPα的基因表达量
4.2.4 成脂分化过程C/EBPα蛋白的表达
4.2.5 成脂分化过程PPARγ蛋白的表达
4.3 讨论
第五章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历
本文编号：4015863
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
1.1 我国畜禽遗传资源现状
1.2 间充质干细胞相关研究
1.2.1 干细胞及其分类
1.2.2 间充质干细胞及其表面抗原的表达
1.2.3 间充质干细胞的形态
1.2.4 间充质干细胞的免疫调节功能
1.2.5 间充质干细胞的多向分化潜能
1.3 脂肪干细胞的研究进展
1.4 真皮间充质干细胞的研究进展
1.5 Wnt信号通路的研究进展及其对脂肪细胞形成的影响
1.5.1 Wnt/β-catenin通路介绍
1.5.2 Wnt/β-catenin通路在脂肪细胞分化中的作用
1.6 研究的目的和意义
第二章 肉鸡脂肪干细胞的分离、培养以及生物学特性的研究
2.1 实验材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验主要的试剂及配制
2.1.3 实验主要的设备及仪器
2.2 实验方法
2.2.1 肉鸡ADSCs分离与培养
2.2.2 肉鸡ADSCs生物学特性鉴定
2.2.3 肉鸡ADSCs三向分化潜能的研究
2.2.4 统计方法
2.3 实验结果
2.3.1 肉鸡ADSCs形态学观察
2.3.2 肉鸡ADSCs生长曲线的绘制
2.3.3 肉鸡ADSCs克隆形成能力检测
2.3.4 肉鸡ADSCs的 RT-PCR检测
2.3.5 肉鸡ADSCs的免疫荧光检测
2.3.6 肉鸡ADSCs的表面标记物阳性率检测
2.3.7 肉鸡ADSCs的诱导分化能力的检测
2.4 讨论
第三章 鹅真皮间充质干细胞的分离、培养以及生物学特性的研究
3.1 实验材料与方法
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验主要的试剂及配制
3.1.3 实验主要的设备及仪器
3.2 实验方法
3.2.1 鹅DMSCs分离与培养
3.2.2 鹅DMSCs生物学特性鉴定
3.2.3 鹅DMSCs三向分化潜能的研究
3.2.4 鹅DMSCs与肉鸡ADSCs成脂分化能力的比对
3.3 实验结果
3.3.1 鹅DMSCs形态学观察
3.3.2 鹅DMSCs生长曲线的绘制
3.3.3 鹅DMSCs克隆形成能力的检测
3.3.4 鹅DMSCs的 RT-PCR检测
3.3.5 鹅DMSCs的免疫荧光检测
3.3.6 流式细胞术分析鹅DMSCs标记物阳性率
3.3.7 鹅DMSCs的诱导分化及鉴定
3.3.8 鹅DMSCs与肉鸡ADSCs成脂分化能力的比对
3.4 讨论
第四章 Wnt信号通路在禽类干细胞向脂肪细胞分化的作用
4.1 实验材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验主要的试剂及配制
4.1.3 实验主要的设备及仪器
4.1.4 实验方法
4.2 实验结果
4.2.1 Wnt/β-catenin信号通路各因子的蛋白表达量
4.2.2 细胞形态学观察以及油红O染色结果
4.2.3 成脂分化过程PPARγ和C/EBPα的基因表达量
4.2.4 成脂分化过程C/EBPα蛋白的表达
4.2.5 成脂分化过程PPARγ蛋白的表达
4.3 讨论
第五章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历
本文编号：4015863
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/4015863.html
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