MicroRNA-98促进猪圆环病毒2型在3D4/21细胞中的复制

发布时间：2024-12-07 04:44

　　 【目的】通过高通量测序的方法获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,并探讨miRNA-98在PCV2复制中的作用。【方法】本研究以猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞为细胞模型,对PCV2感染过程中的3D4/21细胞进行miRNAs差异表达分析,筛选与病毒复制相关的特异性miRNAs,并探讨其在PCV2复制中的作用。【结果】经高通量测序,获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,结合实验室前期研究筛选获得miRNA-98。实验表明,miRNA-98的表达量随PCV2感染时间的延长而持续升高,其变化趋势与Cap蛋白表达变化基本一致,由此推测miRNA-98与PCV2复制正相关。过表达miRNA-98可显著上调Cap蛋白的表达量和PCV2的复制。进一步的研究表明,miRNA-98参与调节宿主免疫相关细胞因子的表达和PCV2的复制。【结论】miRNA-98可通过调节免疫相关细胞因子的表达调控宿主免疫功能,帮助PCV2逃逸宿主免疫,促进PCV2在3D4/21细胞中的复制。这些发现不仅为深入了解PCV2与宿主之间的关系提供了新视角,还有望为猪圆环病毒相关疾病的防控提供新的抗...

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【部分图文】：

图1.PCV2感染3D4/21细胞miRNAs的表达

为了鉴定PCV2感染3D4/21细胞中miRNA-98表达丰度的变化，初步探索其变化与PCV2感染之间的关系，本研究利用Westernblotting和实时荧光定量PCR分别检测PCV2Cap蛋白和miRNA-98在PCV2感染3D4/21细胞后不同时间点的表达量。由图2-A....

图2.PCV2感染3D4/21细胞后不同时间点PCV2 ORF2和miRNA-98的表达

图1.PCV2感染3D4/21细胞miRNAs的表达2.3miRNA-98对PCV2复制的影响

图3.miRNA-98对PCV2复制的作用

Westernblotting检测结果显示(图3-D),mimiccontrol组、inhibitorcontrol组和2010AHCY组几乎无差异，这也表明转染并未对PCV2的感染产生影响。miRNA-98mimic转染后过表达miRNA-98增强了Cap蛋白的表达，相....

图4.miRNA-98对PCV2感染3D4/21过程中细胞因子表达的影响

为了探讨miRNA-98是否参与调节宿主免疫相关细胞因子的表达，本文将3D4/21细胞分别转染miRNA-98mimic及mimiccontrol，随后，感染PCV22010AHCY株(MOI=1)。感染后36h，应用qRT-PCR检测与细胞凋亡、炎症、细胞周期和抗病毒功....

本文编号：4014821