TLR2和TLR4受体封闭肽对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子分泌的影响

发布时间：2025-02-09 14:40

　　Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是参与天然免疫的一类重要的模式识别受体,在天然免疫和获得性免疫反应过程中发挥着重要的作用。当细菌及其毒素等模式识别分子与TLRs结合进而激活TLRs,诱导趋化因子、细胞因子以及炎症介质的大量分泌并促进炎症细胞的浸润,引发炎症反应的发生。研究发现,在抗细菌感染所引发的炎症过程中TLR2和TLR4发挥着核心作用,如能够控制TLR2和TLR4的激活效应,则能够控制细菌感染过程中过度炎症反应的发生。因此,本研究根据文献已公布序列,合成了 TLR2和TLR4的特异性封闭肽。采用荧光定量PCR、ELISA以及Western Blot等技术检测了 TLR2和TLR4的特异性封闭肽对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子IL-1β、IL-10、TNF-α以及RANTES表达和ERK、p38、JNK以及p65磷酸化的影响。TLR2和TLR4封闭肽预处理(24h)的小鼠腹腔巨噬细胞在LPS刺激4h后,荧光定量PCR检测结果显示,与LPS刺激组相比较,CP对照组IL-1β、IL-10、TNF-α以及RANTESmRNA的相对表达量无显著性差异(P>0....

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略语表
1 引言
    1.1 天然免疫研究概述
        1.1.1 天然免疫简述
        1.1.2 天然免疫模式识别作用机制
    1.2 Toll样受体研究概述
        1.2.1 Toll样受体简介
        1.2.2 Toll样受体介导的信号转导通路
        1.2.3 Toll样受体在细菌感染过程中的作用
    1.3 细胞因子研究概述
    1.4 Toll样受体封闭肽的研究概述
    1.5 研究的目的及意义
2 试验内容
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 实验仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养
        2.2.2 TLR2和TLR4封闭肽的合成
        2.2.3 分组及给药
        2.2.4 RT-PCR检测细胞因子mRNA的表达量
        2.2.5 ELISA检测细胞因子蛋白表达量
        2.2.6 Western Blot检测TLR2和TLR4介导的信号通路
3 试验结果
    3.1 BBPs对细胞因子表达的影响
        3.1.1 BBPs对腹腔巨噬细胞细胞因子mRNA表达的影响
            3.1.1.1 BBPs对腹腔巨噬细胞IL-1βmRNA表达的影响
            3.1.1.2 BBPs对腹腔巨噬细胞IL-10 mRNA表达的影响
            3.1.1.3 BBPs对腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA表达的影响
            3.1.1.4 BBPs对腹腔巨噬细胞RANTES mRNA表达的影响
        3.1.2 BBPs对细胞因子蛋白表达的影响
            3.1.2.1 BBPs对腹腔巨噬细胞IL-1β蛋白表达的影响
            3.1.2.2 BBPs对腹腔巨噬细胞IL-10蛋白表达的影响
            3.1.2.3 BBPs对腹腔巨噬细胞TNF-α蛋白表达的影响
            3.1.2.4 BBPs对腹腔巨噬细胞RANTES蛋白表达的影响
    3.2 BBPs对NF-κ B和MAPK激活效应的影响
        3.2.1 BBPs对腹腔巨噬细胞p65磷酸化的影响
        3.2.2 BBPs对MAPK激活效应的影响
4 讨论
5 结论
致谢
参考文献
作者简介



本文编号：4032391