寒地獭兔肠道菌群定植的初步研究

发布时间：2017-06-18 19:19

  本文关键词：寒地獭兔肠道菌群定植的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：獭兔的肠道疾病是危害兔业养殖的重要因素之一,发病率非常高,而且不易治愈,给养殖户造成极大的损失,成为从业者广泛关注的焦点。极为突出的是断奶獭兔肠道疾病的出现,在饲养管理中通常采用对健康兔提前接种疫苗或添加抗生素来预防和治疗。但伴随着抗生素的滥用,导致细菌产生很强的耐药性,耐药菌株的出现在一定程度上也会威胁人类的健康。抗生素替代品的研制是解决獭兔肠道疾病的趋向,当前微生态制剂作为主要的抗生素替代品很受养殖户的欢迎,被广泛应用于养殖环节,但目前还没有研发出专门用在獭兔日粮中的微生态制剂。本试验在寒地獭兔肠道菌群定植规律初步研究的基础上,研究软粪液和小肠液对幼兔肠道菌群定植的影响,为獭兔微生态制剂的研制奠定基础。试验一旨在探究相同生活环境下不同日龄的獭兔肠道菌群定植的规律,分别对不同日龄健康獭兔肠壁内容物中的细菌提基因组DNA,应用Real-time PCR方法对不同日龄的獭兔肠道菌群的结构进行分析。结果显示1d时肠道内定植的细菌总量最少,5和10d时各种细菌的浓度开始增加,不同细菌之间有显著差异(P0.05);20d时浓度迅速增加,定植在十二指肠、空肠和回肠、盲肠内浓度最大的细菌分别为双歧杆菌、韦荣球菌、梭菌,数值显著高于其他菌种(P0.05);30-60d,定植在肠道内的梭菌、韦荣球菌、双歧杆菌和肠球菌浓度显著高于其他细菌(P0.05),盲肠内的拟杆菌浓度高于小肠;120d时双歧杆菌、乳酸杆菌浓度略微减小,梭菌以及韦荣球菌保持稳定,不同细菌之间有显著差异(P0.05)。试验二为探究软粪液以及小肠液对獭兔肠道内细菌定植的影响,通过灌喂软粪冻干液和小肠冻干液,比较獭兔肠道内定植的7种细菌的浓度变化。90只幼兔平均分成三组,分别灌喂软粪冻干液、小肠冻干液,纯净水为空白对照。在超净台下刮取32、46d幼兔肠壁上的内容物,提取细菌的DNA。设计7种细菌的特异性引物,利用Real-time PCR方法,定量细菌的浓度。结果表明,与空白组相比,灌喂软粪冻干液32、46d的幼兔,空肠内定植的拟杆菌以及双歧杆菌浓度升高(P0.05),回肠内的梭菌、韦荣球菌的浓度升高(P0.01),盲肠内定植的双歧杆菌浓度升高(P0.05)。与空白组相比,灌喂小肠冻干液的32d幼兔其十二指肠以及回肠内的梭菌浓度升高(P0.01),双歧杆菌浓度升高(P0.05);46d幼兔回肠内定植的韦荣球菌以及双歧杆菌的浓度升高(P0.05)。综上所述:獭兔不同生长阶段,定植在肠道不同部位中的细菌呈现不同的变化规律,构成稳定的微生态平衡系统。软粪液以及小肠液能提高拟杆菌、梭菌、韦荣球菌、双歧杆菌在肠道内的定植效果。
【关键词】：獭兔 软粪液 小肠液 肠道菌群 定植
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S829.1
【目录】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 引言11-22
• 1.1 獭兔11-14
• 1.1.1 獭兔的外部形态11
• 1.1.2 獭兔的食性11
• 1.1.3 獭兔的食粪行为11-12
• 1.1.4 獭兔消化系统发育特点12-13
• 1.1.5 獭兔腹泻13-14
• 1.2 肠道菌群的研究进展14-18
• 1.2.1 肠道菌群的概念14
• 1.2.2 肠道菌群的分类14-16
• 1.2.3 肠道菌群的生理作用16-17
• 1.2.4 肠道菌群失调17
• 1.2.5 肠道菌群失调的危害17-18
• 1.3 肠道菌群定植的研究18-20
• 1.3.1 定植的概念18
• 1.3.2 定植抗力18-19
• 1.3.3 定植的条件19
• 1.3.4 影响定植的因素19-20
• 1.4 微生物多样性分析方法的研究进展20-21
• 1.4.1 传统的研究方法20
• 1.4.2 实时荧光定量PCR技术20-21
• 1.4.3 变性梯度凝胶电泳技术21
• 1.5 试验研究的目标及意义21-22
• 2 材料与方法22-27
• 2.1 材料22-24
• 2.1.1 试验动物22
• 2.1.2 软粪液和小肠液冻干粉的制备22-23
• 2.1.3 主要试剂23
• 2.1.4 主要仪器23-24
• 2.1.5 引物的设计与合成24
• 2.2 方法24-27
• 2.2.1 獭兔肠道内容物基因组DNA的提取24-25
• 2.2.2 基因组DNA的含量及纯度检测25
• 2.2.3 常规PCR反应25
• 2.2.4 细菌的定量检测25-26
• 2.2.5 试验数据统计分析26-27
• 3 结果与分析27-38
• 3.1 引物的特异性检测27
• 3.2 标准曲线27-30
• 3.3 溶解曲线30
• 3.4 肠道内容物细菌的定量检测30-38
• 3.4.1 不同日龄肠道定植菌群的测定30-33
• 3.4.2 软粪液和小肠液对肠道菌群定植的影响33-38
• 4 讨论38-41
• 4.1 不同日龄寒地獭兔肠道菌群的定植38-39
• 4.2 软粪液和小肠液对寒地獭兔肠道菌群定植的影响39-40
• 4.3 研究的创新性40
• 4.4 研究中存在的问题和展望40-41
• 5 结论41-42
• 致谢42-43
• 参考文献43-50
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文50

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 雷春龙;董国忠;;肠道菌群对动物肠黏膜免疫的调控作用[J];动物营养学报;2012年03期

2 赵春苗;徐春厚;;变性梯度凝胶电泳技术及其在动物肠道菌群研究中的应用[J];中国畜牧兽医;2012年07期

3 李勤健;猪肠道菌群对其生长发育的影响[J];吉林畜牧兽医;2000年02期

4 熊德鑫;人体肠道菌群正常值研究的近况[J];江西省科学院院刊;1983年02期

5 李勤建;猪肠道菌群对其生长发育的影响[J];畜禽业;1999年10期

6 刘健华,陈杖榴,柳阳伟,文研,何芳;低浓度恩诺沙星在离体肠道模拟系统中对人体肠道菌群的影响[J];中国兽医杂志;2003年07期

7 李菊;张日俊;;动物肠道菌群结构与代谢化学成分的相互关系[J];中国微生态学杂志;2008年02期

8 崔赢佩;;猪肠道菌群对其发育的影响[J];吉林农业;2008年10期

9 马晓迪;Gino Lorenzoni;;肠道菌群和营养需求需完美的平衡[J];国外畜牧学(猪与禽);2011年03期

10 周玉法;李代军;刘东燕;刘敬博;姚淑红;蔡玉梅;;4种常见淡水鱼肠道菌群的分析[J];中国畜牧兽医;2012年08期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 曹虹;郝小燕;彭亮;方幸幸;;肠道菌群与机体代谢及相关疾病——感染微生态学的研究进展[A];新发和再发传染病防治热点研讨会论文集[C];2011年

2 王保红;李e，

本文编号：460557