沙门菌烈性噬菌体的分离鉴定及其生物学特性的研究

发布时间：2017-06-26 07:22

  本文关键词：沙门菌烈性噬菌体的分离鉴定及其生物学特性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：以1株肠炎沙门菌(CICC21482)为宿主菌,从湖北省某规模化养猪场的污水中分离得到1株烈性沙门菌噬菌体,命名为SP01,并对其生物学特性进行了初步研究。采用双层平板法筛选并纯化噬菌体,观察噬菌斑的形态;采用透射电镜观察SP01颗粒;酚-氯仿法提取SP01核酸,酶切分析其核酸类型。同时对噬菌体SP01的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)、一步生长曲线、热稳定性、p H稳定性、噬菌体SP01对细菌的裂解曲线及裂解谱等生物学特性进行了研究。结果,噬菌体SP01噬菌斑形态呈圆形、透亮,边界清晰,无晕环,直径约为1~2 mm;电镜下可见噬菌体SP01有一正多面体立体对称头部,直径约63 nm,含非收缩性尾部,尾长约158 nm,为长尾科噬菌体;提取基因组,酶切鉴定该噬菌体核酸类型为双链DNA;当MOI=0.1时,子代噬菌体滴度较高;噬菌体SP01除对本身宿主菌产生裂解外,还裂解猪霍乱沙门菌和都柏林沙门菌;一步生长曲线试验结果显示,其感染宿主菌的潜伏期约为20 min,裂解期约为60 min,平均裂解量约为120 PFU/cell;噬菌体SP01在20~40℃稳定,在p H=4.0~11.0稳定;对体外培养的特定血清型的沙门菌具有良好的裂菌效果。上述结果表明,噬菌体SP01为1株沙门菌烈性噬菌体,对不同温度、p H的环境均有较强的适应能力且杀菌能力较强,具有开发为抗沙门菌制剂的潜力。
【作者单位】： 华中农业大学动物医学院;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室;华中农业大学湖北省生猪健康养殖协同创新中心;
【关键词】： 沙门菌噬菌体 分离鉴定 生物学特性
【基金】：公益性行业农业科研专项(201403054) 湖北省科技支撑计划项目(2013BBB14;2014BBB010)
【分类号】：S852.61
【正文快照】： 沙门菌(Salmonella)对人和多种动物有致病性,可导致伤寒、副伤寒、急性胃肠炎和败血症4种病型。一直以来,由沙门菌导致的食品安全事件频发,受到世界各国的广泛关注。同时,抗生素的大量不合理应用使得细菌耐药性不断增强,疗效也越来越得不到保障。近二十年来,沙门菌的多重耐药

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本文编号：485323