藏橐吾地上部分生物碱成分分析及其毒性试验

发布时间：2017-06-28 05:11

  本文关键词：藏橐吾地上部分生物碱成分分析及其毒性试验，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：长期以来,由于天然草地超载过牧和牲畜选择性采食等因素,菊科橐吾属植物在青藏高原高寒草甸草地上大量繁衍,借助化感作用,该属植物除了抑制优质牧草的生长外,还促使其他毒害草和不可食用牧草的生长,使得草地群落结构发生改变,使其成为草原上的优势种群,已经成为草原退化的标志之一。大量出现的藏橐吾(Ligularia rumicifolia)严重侵蚀优质牧草的生长,造成草地生产能力下降,加剧草畜矛盾,对畜牧业的健康发展和草原生态平衡构成严重威胁。目前,国内外对于藏橐吾的化学成分以及毒理学等方面的研究还是一片空白,本研究以采自西藏堆龙德庆县的藏橐吾为研究对象,通过GC-MS检测藏橐吾所含生物碱种类,通过小鼠的毒性试验,测定LD50以及小鼠亚急性毒性的血清生化指标、观察器官组织病理学等方面变化,评价藏橐吾的毒性,为藏橐吾的毒理学与毒性机制研究,以及藏橐吾的综合利用提供理论依据。本试验得到以下结果。1.生物碱成分分析:采用热回流提取法,运用薄层色谱、柱层析和GC-MS对藏橐吾所含生物碱种类及相对含量进行分离和测定。结果表明:藏橐吾地上部分酸性氯仿部分、碱性氯仿部分和碱性正丁醇部分出膏率分别为0.55%、0.31%和16.58%;薄层色谱发现,酸性氯仿部分含有2种生物碱、碱性氯仿部分含有4种生物碱、碱性正丁醇部分1种生物碱;GC-MS检测发现,藏橐吾氯仿部分含有4种生物碱,分别为千里光碱、全缘千里光碱、阔叶千里光碱和芥酸酰胺。2.小鼠急性毒性试验:通过小鼠灌胃和腹腔注射来确定藏橐吾地上部分水提液的毒性大小。结果显示:水提液小鼠灌胃和腹腔注射LD50分别为91.69 g/kg和15.75g/kg,95%可信限分别为83.10~101.16 g/kg和14.01~17.72 g/kg。结合中毒小鼠临床症状和病理剖检变化,综合分析认为藏橐吾有毒性,主要损伤胃肠道、肝脏和脾脏等脏器。3.小鼠亚慢性毒性试验:通过饲喂不同比例藏橐吾地上部分草粉的鼠粮,观察小鼠采食后的临床表现、采食量、体质量以及主要器官脏器系数、血清生化指标和组织结构等变化。结果表明:饲料中添加10%藏橐吾地上部分草粉时,对小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大脑、小脑、睾丸和卵巢等实质器官没有明显毒性损伤;在试验前12周,添加2.5%和10%藏橐吾对小鼠具有一定增重作用。
【关键词】：藏橐吾 生物碱 小鼠 毒性试验
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S859.87
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-13
• 文献综述13-31
• 第一章 菊科橐吾属植物危害、化学成分及药理活性研究进展13-24
• 1.1 橐吾属植物分布及对草原、牲畜的危害13-16
• 1.1.1 橐吾属植物的分布及对草原危害13-15
• 1.1.2 橐吾属植物对牲畜危害15-16
• 1.2 橐吾属植物化学成分研究16-21
• 1.2.1 生物碱类16-17
• 1.2.2 黄酮类17
• 1.2.3 挥发油类17-18
• 1.2.4 倍半萜类18
• 1.2.5 三萜类18-20
• 1.2.6 苯并呋喃类20-21
• 1.3 橐吾属植物药理活性研究21-24
• 1.3.1 镇咳祛痰21
• 1.3.2 抗炎免疫21-22
• 1.3.3 抗肿瘤及抗癌活性22
• 1.3.4 抗氧化、抗溃疡和预防急性乙醇中毒22-23
• 1.3.5 降血糖和对心血管系统的药理作用23-24
• 第二章 吡咯里西啶生物碱研究进展24-31
• 2.1 动物和人类PAS中毒的历史24-27
• 2.1.1 动物PAs中毒24
• 2.1.2 人类PAs中毒24-27
• 2.2 PAS的化学结构及其与毒性的关系27-28
• 2.3 PAS毒性研究进展28-31
• 2.3.1 肝脏毒性28-29
• 2.3.2 生殖毒性29
• 2.3.3 神经毒性29-30
• 2.3.4 基因毒性30-31
• 试验研究31-57
• 第三章 藏橐吾地上部分生物碱成分分析31-40
• 3.1 材料31-32
• 3.1.1 植物样品31
• 3.1.2 主要试剂31-32
• 3.1.3 主要仪器32
• 3.2 方法32-33
• 3.2.1 生物碱预实验32
• 3.2.2 生物碱的系统提取32
• 3.2.3 各萃取段薄层色谱分析32
• 3.2.4 氯仿部分生物碱柱层析分离与纯化32
• 3.2.5 氯仿部分生物碱GC-MS分析32-33
• 3.3 结果33-38
• 3.3.1 生物碱预实验结果33
• 3.3.2 生物碱提取结果33
• 3.3.3 各萃取段薄层色谱分析结果33-35
• 3.3.3.1 酸性氯仿部分薄层色谱分析结果33
• 3.3.3.2 碱性氯仿部分薄层色谱分析结果33
• 3.3.3.3 碱性正丁醇部分薄层色谱分析结果33-35
• 3.3.4 氯仿部分生物碱柱层析分离与纯化35
• 3.3.5 氯仿部分生物碱GC-MS分析35-38
• 3.4 讨论38-39
• 3.4.1 藏橐吾地上部分中的生物碱38
• 3.4.2 藏橐吾地上部分中有毒生物碱的毒性大小38-39
• 3.4.3 动物藏橐吾中毒的防控39
• 3.5 小结39-40
• 第四章 藏橐吾地上部分小鼠急性毒性试验40-45
• 4.1 材料40-41
• 4.1.1 植物样品40
• 4.1.2 试验动物40
• 4.1.3 水提液的制备40-41
• 4.2 方法41
• 4.2.1 半数致死量（LD_(50)）试验41
• 4.2.2 计算方法41
• 4.3 结果41-43
• 4.3.1 灌胃染毒结果41-42
• 4.3.1.1 LD_(50)及95%可信限结果41
• 4.3.1.2 小鼠临床症状及病理剖检变化41-42
• 4.3.2 腹腔注射染毒结果42-43
• 4.3.2.1 LD_(50)及 95%可信限结果42
• 4.3.2.2 小鼠临床症状及病理剖检变化42-43
• 4.4 讨论43
• 4.4.1 藏橐吾对小鼠的毒性大小43
• 4.4.2 不同染毒途径对藏橐吾毒性的影响43
• 4.5 小结43-45
• 第五章 藏橐吾地上部分小鼠亚慢性毒性试验45-57
• 5.1 材料45-46
• 5.1.1 植物样品45
• 5.1.2 试验动物45
• 5.1.3 动物饲料45
• 5.1.4 主要仪器45-46
• 5.2 方法46-47
• 5.2.1 动物分组与饲料46
• 5.2.2 临床症状、采食量、体质量及脏器系数记录46
• 5.2.3 血清生化指标测定46
• 5.2.4 组织病理学变化46
• 5.2.5 超微结构变化46
• 5.2.6 数据分析46-47
• 5.3 结果47-55
• 5.3.1 临床症状、采食量及体质量变化47
• 5.3.1.1 临床症状观察47
• 5.3.1.2 采食量变化47
• 5.3.1.3 体质量变化47
• 5.3.2 脏器系数变化47-50
• 5.3.2.1 心脏脏器系数变化47-48
• 5.3.2.2 肝脏脏器系数变化48
• 5.3.2.3 脾脏脏器系数变化48
• 5.3.2.4 肺脏器系数变化48-49
• 5.3.2.5 肾脏脏器系数变化49-50
• 5.3.2.6 脑脏器系数变化50
• 5.3.3 血清生化指标变化50-52
• 5.3.3.1 ALT变化50
• 5.3.3.2 AST变化50
• 5.3.3.3 ALP变化50-51
• 5.3.3.4 LDH变化51
• 5.3.3.5 总蛋白变化51
• 5.3.3.6 白蛋白变化51-52
• 5.3.3.7 Ca~(2+)变化52
• 5.3.4 组织病理学变化52-55
• 5.3.5 超微结构变化55
• 5.4 讨论55-56
• 5.4.1 藏橐吾对小鼠临床症状、采食量和体质量的影响55
• 5.4.2 藏橐吾对小鼠脏器系数和血清生化指标的影响55-56
• 5.4.3 藏橐吾对小鼠组织结构的影响56
• 5.5 小结56-57
• 结论57-58
• 参考文献58-64
• 附录64-68
• 致谢68-69
• 作者简介69

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