新型鸭细小病毒VP3基因的原核表达及多克隆抗体的制备

发布时间：2017-06-28 06:05

  本文关键词：新型鸭细小病毒VP3基因的原核表达及多克隆抗体的制备，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：应用PCR方法扩增了新型鸭细小病毒(novel duck parvovirus,NDPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体p GEX-4T-1中,获得重组质粒p GEX-VP3。将p GEX-VP3转化BL21感受态细胞后,用1.0mmol/L IPTG于37℃进行诱导。最后,分别用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定。结果,NDPV VP3蛋白在大肠杆菌细胞中成功获得表达,表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量为84 ku。将纯化的重组VP3蛋白免疫实验家兔,制备多克隆抗体。Western-blot检测结果表明,该抗体能同时与重组的NDPV VP3蛋白及自然感染的NDPV发生反应,说明制备的抗体具有良好的抗原反应性。这些结果为进一步建立NDPV检测方法和研发新型疫苗研究奠定了物质基础。
【作者单位】： 甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;安徽农业大学动物科技学院;西北农林科技大学动物医学院;
【关键词】： 新型鸭细小病毒 VP基因 原核表达 多克隆抗体
【基金】：上海市科委科技创新医药与农业领域项目(13391901602) 国家自然科学基金(31502068;No.31270194) 农业部公益性行业科研专项(201303046) 上海市闵行区高层次人才队伍建设专项资金
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 2014年下半年以来,在我国山东、安徽、江苏等地鸭群中大面积爆发了一种以鸭喙畸形、萎缩变短,舌头肿大外垂,两腿无力、行走困难,生长发育障碍等为主要症状的传染病,俗称“鸭短喙—侏儒综合征”或“鸭大舌病”。经鉴定该病病原为一种新型鸭细小病毒(novel duck parvovirus,NDPV

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