马波沙星在多杀性巴氏杆菌感染小鼠体内的药动—药效学同步模型研究

发布时间：2017-06-30 07:17

  本文关键词：马波沙星在多杀性巴氏杆菌感染小鼠体内的药动—药效学同步模型研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：通过建立多杀性巴氏杆菌感染的小鼠肺炎感染模型,比较马波沙星在感染小鼠体内的血浆、肺组织、上皮细胞衬液中(epithelial lining fluid,ELF)的药动学特点,探究马波沙星在肺部的渗透能力;采用不同的单药剂量给药方案治疗肺部感染的小鼠,测定体内马波沙星的抗菌效应。结合马波沙星在多杀性巴氏杆菌感染的小鼠血浆药动学和药效学研究,建立马波沙星对多杀性巴氏杆菌的体内药动学/药效学(PK/PD)模型,并监测给药治疗后感染部位耐药细菌选择性富集,以期为兽医临床马波沙星治疗动物呼吸道疾病提供基础实验数据。本研究的主要内容及结果如下:采用微量肉汤稀释法,参考CLSI相关资料,测定马波沙星对三株多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC),结果表明马波沙星对CVCC434、CVCC411、CVCC1669的MIC分别为0.125、0.03125、0.0625μg/mL;采用琼脂平板法测定马波沙星对三株多杀性巴氏杆菌的防突变浓度(MPC),结果表明,马波沙星对多杀性巴氏杆菌CVCC434、CVCC411、CVCC1669的MPC分别为0.5、0.2、0.3μg/mL。采用气管插管法分别对中性粒细胞减少和免疫正常的小鼠进行肺部感染,接菌量为5×108CFU/mL(50μL),小鼠于感染后12、24 h分别处死,立即无菌操作取出肺部,匀浆后菌落计数。结果表明:免疫正常小鼠感染多杀性巴氏杆菌后,细菌在小鼠肺部细菌生长情况差异大,且有明显的自身清除现象,无法建立稳定的肺炎模型。中性粒细胞减少的小鼠感染12 h,肺部菌量达到~5×107 CFU,小鼠出现嗜睡,呼吸急促等症状,以此作为马波沙星给药治疗的时间点,感染24 h后,所有小鼠接近死亡,肺部菌量高达109 CFU。故本研究采用中性粒细胞减少的小鼠建立小鼠肺炎感染模型。小鼠感染多杀性巴氏杆菌12 h后,皮下注射不同剂量(2.5、5、10、20 mg/kg)的马波沙星后,在给药后0.083,0.25,0.5,1,2,4,6,8,12,24 h获得血浆、支气肺泡管灌洗液和取肺组织样品。建立马波沙星在三种生物样品中的提取方法,采用高效液相色谱法(HPLC)检测小鼠血浆、肺组织、支气管灌洗液中的马波沙星浓度,用脲酶试剂盒测定血浆和支气管灌洗液中的尿素氮的比值,通过公式上皮细胞衬液(ELF)的药物浓度=支气管肺泡灌洗液(bronchialveolar lavage,BAL)药物浓度×血浆尿素氮/支气管肺泡灌洗液尿素氮的比值,来计算上皮细胞衬液的马波沙星浓度。应用WinNonlin5.2.1药动学软件提供的非房室模型对药物浓度-时间数据进行处理。结果表明:马波沙星在感染小鼠肺组织的药物浓度是血浆药物浓度的2~3倍,上皮细胞衬液的药物浓度稍高于血浆药物浓度,上皮细胞衬液中药物AUC与血浆游离药物AUC的比值约为2;马波沙星在感染小鼠体内的药动学过程呈线性。建立3株多杀性巴氏杆菌感染小鼠肺炎模型,采用8种不同的给药剂量对感染小鼠进行治疗,考察马波沙星对多杀性巴氏杆菌的体内抗菌效应。结合血浆药动学参数和体外MIC值,采用Sigmoid E_(max)模型对体内抗菌活性数据进行拟合。结果表明,马波沙星对多杀性巴氏杆菌达到静态效应、下降2-log和3-log杀菌效应所需的fAUC24h/MIC(3株菌所需平均值)分别为15.8 h、70 h、153h。
【关键词】：马波沙星 多杀性巴氏杆菌 上皮细胞衬液 小鼠肺部感染模型 药动/药效学模型
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S859.7
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 缩略语表7-10
• 1 前言10-13
• 1.1 研究背景10-11
• 1.1.1 马波沙星的药效学研究进展10
• 1.1.2 马波沙星的药动学研究进展10
• 1.1.3 多杀性巴氏杆菌10-11
• 1.1.4 支气管肺泡灌洗技术11
• 1.1.5 马波沙星对多杀性巴氏杆菌PK-PD模型的研究概况11
• 1.2 研究目的及意义11-12
• 1.3 研究技术路线12-13
• 2 材料与方法13-23
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 药品13
• 2.1.2 试剂13
• 2.1.3 试验仪器设备13-14
• 2.1.4 溶液的配制14
• 2.1.5 培养基和计数平板的制备14-15
• 2.1.6 实验动物与菌株15
• 2.2 方法15-23
• 2.2.1 马波沙星检测方法的建立15
• 2.2.2 样品的前处理方法15-16
• 2.2.3 方法学评价16-19
• 2.2.4 马波沙星对多杀性巴氏杆菌体外抗菌活性19-20
• 2.2.5 小鼠感染模型的建立20-21
• 2.2.6 马波沙星在感染小鼠体内的药动学研究21-22
• 2.2.7 马波沙星在感染小鼠体内的药效学研究22
• 2.2.8 数据处理与PK/PD模型的建立22-23
• 3 结果与分析23-36
• 3.1 检测方法的验证23-29
• 3.2 马波沙星对多杀性巴氏杆菌的抗菌活性29
• 3.3 小鼠肺部感染模型29-30
• 3.4 马波沙星在感染小鼠体内血浆、肺组织、上皮细胞衬液的药动学30-33
• 3.5 马波沙星在感染小鼠体内的药效学结果33
• 3.6 PK/PD模型的建立33-36
• 4 讨论与结论36-42
• 4.1 讨论36-42
• 4.1.1 小鼠肺部感染模型36-37
• 4.1.2 基于MPC的PK-PD研究37-38
• 4.1.3 马波沙星在小鼠血浆、ELF、肺组织中的药动学研究38-39
• 4.1.4 马波沙星在感染小鼠体内PK/PD同步模型研究39-42
• 5 全文总结42-43
• 致谢43-44
• 参考文献44-47
• 附录47-57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 瞿颖;卢燕;孙美珍;李晓虹;仇珍珍;曹长福;曾振灵;;马波沙星在健康小鼠和感染多杀性巴氏杆菌小鼠体内的药动学比较[J];华南农业大学学报;2016年02期

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  本文关键词：马波沙星在多杀性巴氏杆菌感染小鼠体内的药动—药效学同步模型研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：501097