PEDV、TGEV和PRoV多重RT-PCR检测方法的建立及应用

发布时间：2017-06-30 11:22

  本文关键词：PEDV、TGEV和PRoV多重RT-PCR检测方法的建立及应用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪轮状病毒(PRoV)的快速鉴别检测方法,本试验针对PEDV、TGEV、PRoV的基因组序列设计3对特异性引物PEDV-N、TGEV-M和PRoV-VP6,分别扩增PEDV N基因、TGEV M基因和PRoV VP6基因。经优化反应条件,成功建立了能同时检测并区分PEDV、TGEV、PRoV的多重RT-PCR方法。该方法可特异扩增PEDV、TGEV、PRoV相应的基因片段,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)均无交叉反应;对PEDV、TGEV、PRoV基因重组质粒标准品的检出限分别为1.41×103、1.41×102和1.41×103拷贝/μL;在相同条件下重复试验可获得一致的结果。应用该方法对临床采集的190份腹泻病料进行检测,结果PEDV阳性42份,阳性率22.11%;TGEV阳性58份,阳性率30.53%;PRoV阳性34份,阳性率17.89%,且存在不同病毒混合感染的现象。结果表明,所建立的多重RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的优点,可用于PEDV、TGEV和PRoV的临床检测和流行病学调查。
【作者单位】： 广西大学动物科学技术学院;广西动物疫病预防控制中心;
【关键词】： 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 多重RT-PCR 检测方法
【基金】：广西水产畜牧科技项目(桂渔牧科201528017)
【分类号】：S858.28
【正文快照】： 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic di-arrhea virus,PEDV)引起猪的一种急性、高度传播性的肠道疾病,以急性肠炎、水样腹泻、呕吐和严重脱水为主要特征。各年龄猪均易感,尤其是哺乳仔猪,发病率可达100%,死亡率可达80%~100%。

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本文编号：501757