CIDE家族和脂肪酸合成相关基因在高能低蛋白日粮诱导的FLHS中的表达差异研究

发布时间：2017-07-30 08:30

  本文关键词：CIDE家族和脂肪酸合成相关基因在高能低蛋白日粮诱导的FLHS中的表达差异研究

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【摘要】：脂肪肝出血综合征(Fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是一种以肝细胞中大量的脂肪异常沉积而引起的营养代谢性疾病,它普遍发生于处在产蛋高峰期的笼养蛋鸡,可导致蛋鸡的产蛋率急剧下降和肝脏破裂引起突然的死亡。CIDE家族蛋白是一种脂类相关蛋白,它包含有CIDEa、CIDEb、CIDEc/Fsp27三种基因。它们和脂肪酸合成相关基因(FAS、ACC、ME)均可参与脂质代谢的调控,尤其是在脂肪组织和肝脏组织中脂类的稳态方面的调控起着重要作用。同时,CIDEa和CIDEc均能参与肥胖症、脂肪肝、Ⅱ型糖尿病的调控。本研究以海兰褐蛋鸡为试验动物,试验期间将其160羽蛋鸡随机分成对照组(80羽)和病理组(80羽),对照组饲喂基础日粮,病理组饲喂高能量低蛋白日粮,让其自由采食,给予充分光照(16小时),在试验期第80天采取肝脏、肾脏和脂肪组织样品,根据肝脏颜色及肝脏石蜡切片观察,同时参照Thomas Lionel Barton评分标准,将其划分为轻度FLHS组和重度FLHS组,然后采用real-time PCR方法检测对照组及病理组中肝脏、肾脏和各脂肪组织中的CIDEa、CIDEc和脂肪酸合成相关基因(FAS、ME、ACC)mRNA表达差异,拟揭示CIDEa、CIDEc和脂肪酸合成相关基因(FAS、ME、ACC)与FLHS的相关性。结果表明:(1)肝脏经HE染色结果显示:大量肝细胞发生脂肪变性,且肝细胞内含有许多大小不等的脂滴,表明高能量低蛋白日粮成功诱导FLHS。(2)CIDEa和CIDEc在轻度FLHS组和重度FLHS组中表达水平显著增加(P0.05),表明在FLHS发生过程中CIDEa和CIDEc表达量与其发病程度呈正相关。(3)在FLHS病理模型鸡只中FAS、ME、ACC等脂肪合成酶基因表达水平显著高于对照组(P0.05或P0.01),揭示FAS、ME、ACC的表达差异与其发病程度成正相关。以上结果为进一步研究FLHS的分子机制提供理论基础。
【关键词】：海兰褐蛋鸡 脂肪肝出血综合征 CIDEa CIDEc FAS ME ACC
【学位授予单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 英文缩写词7-8
• 第一部分 文献综述8-23
• 1 蛋鸡脂肪肝出血综合征（FLHS）的研究进展8-13
• 1.1 脂肪肝的发病机理进展8-9
• 1.2 FLHS产生因素9-10
• 1.2.1 营养与管理因素9-10
• 1.2.2 遗传因素10
• 1.2.3 激素因素10
• 1.2.4 中毒因素10
• 1.3 FLHS临床症状10-11
• 1.4 FLHS的判定标准11
• 1.5 家禽的脂肪代谢11-13
• 1.5.1 脂肪的来源11
• 1.5.2 脂肪的合成11-12
• 1.5.3 脂肪的转运12
• 1.5.4 脂肪的分解12-13
• 2 CIDE家族蛋白的研究进展13-18
• 2.1 CIDE家族蛋白概述13-14
• 2.2 CIDEa蛋白14-15
• 2.3 CIDEa与脂质代谢的关系15
• 2.4 CIDEc蛋白15-16
• 2.5 CIDEc与脂质代谢的关系16-17
• 2.6 CIDEa及CIDEc与脂肪肝的关系17-18
• 3 脂肪酸合成相关酶的研究进展18-22
• 3.1 ACC的研究进展18-19
• 3.1.1 ACC的结构及定位18
• 3.1.2 ACC的表达与调控18-19
• 3.2 FAS的研究进展19-20
• 3.2.1 FAS结构及定位19
• 3.2.2 FAS的表达与调控19-20
• 3.2.3 FAS在脂类代谢中的作用20
• 3.3 ME的研究进展20-22
• 3.3.1ME结构及定位20-21
• 3.3.2 ME的表达与调控21-22
• 4 本研究的目的和意义22-23
• 第二部分 试验研究23-43
• 1 材料与方法23-30
• 1.1 试验材料23-25
• 1.1.1 试验动物23
• 1.1.2 主要仪器23-24
• 1.1.3 主要试剂24
• 1.1.4 试剂配制24
• 1.1.5 试验日粮配方24-25
• 1.2 试验方法25-28
• 1.2.1 试验动物模型的建立及分组25-26
• 1.2.2 血清制备及主要检测指标26
• 1.2.3 肝脏组织采取26
• 1.2.4 脂肪组织采取26
• 1.2.5 石蜡切片制作26-27
• 1.2.6 RNA提取27
• 1.2.7 RNA完整性检测27
• 1.2.8 RNA逆转录为cDNA27-28
• 1.3 目的基因PCR扩增及检测28-30
• 1.3.1 引物设计及检验28-29
• 1.3.2 实时荧光定量PCR29-30
• 1.4 数据处理30
• 2 试验结果与分析30-38
• 2.1 高能低蛋白诱导FLHS病理模型建立30-33
• 2.1.1 剖检结果30
• 2.1.2 肝脏HE染色30-32
• 2.1.3 血清生化指标结果分析32-33
• 2.2 RNA完整性检测结果33
• 2.3 FLHS中各组织CIDEa、CIDEc的表达结果33-37
• 2.3.1 肝脏和肾脏及脂肪组织中CIDEa的表达变化34-35
• 2.3.2 在肝脏和肾脏及脂肪组织中CIDEc的表达变化35-37
• 2.4 FLHS中肝脏的脂肪酸合成基因（FAS、ACC、ME）的表达差异37-38
• 2.4.1 FLHS中肝脏的FAS表达变化37
• 2.4.2 FLHS中肝脏的ACC表达变化37
• 2.4.3 FLHS中肝脏的ME表达变化37-38
• 3 讨论38-42
• 3.1 高能量低蛋白日粮诱发FLHS38
• 3.2 FLHS的评判标准38-39
• 3.3 血清生化指标与FLHS的关系39-40
• 3.4 CIDE家族基因与FLHS的关系40-41
• 3.5 脂肪酸合成相关基因与FLHS的关系41-42
• 4 全文结论42-43
• 参考文献43-49
• 致谢49

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1 黄恩福;CIDE家族和脂肪酸合成相关基因在高能低蛋白日粮诱导的FLHS中的表达差异研究[D];江西农业大学;2016年

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本文编号：593362