猪PRRSV和PCV2双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

发布时间：2017-08-08 15:30

  本文关键词：猪PRRSV和PCV2双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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【摘要】：为快速及定量的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2),本研究根据GenBank中登录的PRRSV和PCV2基因组确定了其基因保守序列,分别设计其特异性探针和引物,建立了PRRSV-PCV2双重TaqMan荧光定量PCR检测方法。特异性试验显示该方法对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒及猪瘟病毒的检测结果均为阴性。对PRRSV和PCV2的检测灵敏度均达10拷贝/μl。重复性试验结果显示批内、批间变异系数均小于4%。应用该方法对60份已知临床病料进行检测,结果检出PRRSV和PCV2阳性感染率分别为30.67%和35%,混合感染率为11.67%,与已知结果的符合率为100%。该方法具有敏感、快速、特异、定量、重复性、稳定性好等优点,在用于PRRSV和PCV2感染的快速鉴别诊断的同时,在细胞培养特性以及疫苗生产检测中也具有广阔的应用前景。
【作者单位】： 广东海大集团股份有限公司;广东海大畜牧兽医研究院;
【关键词】： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒Ⅱ型 双重Man荧光定量PCR
【基金】：广东省科技项目(2013B020401003)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive andrespiratory syndrome,PRRS)和猪圆环病毒II型(Porcine circovirus type2,PCV2)均是严重危害猪只的病毒性疾病,常以单独或混合感染的方式感染猪,造成较高的发病率和死亡率,并通过各种传播途径进行快速传播[1]。其中PRRS是由PRRS病

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