萨能奶山羊精液的品质检测及低温液态保存效果的研究

发布时间：2017-08-11 05:11

  本文关键词：萨能奶山羊精液的品质检测及低温液态保存效果的研究

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【摘要】：奶山羊精子对低温很敏感,虽然解冻后活力能达到要求但是受胎率很低。奶山羊精液的低温液态保存,不但能有效的延长保存时间而且还能保持很好的活力,配合人工授精技术提高优秀奶山羊的利用率。本试验以西农萨能奶山羊为研究对象,进行奶山羊精液低温(4℃)液态保存的研究。首先对萨能奶山羊的精液品质进行检测,试验共6只羊进行10个月的人工采精,统计精液的指标为:射精量1.35±0.54ml,精子密度25.25±3.35×108/ml,质膜完整率(%)41.85±3.73,顶体完整率(%)43.10±2.34,精子活力(%)71.35±4.28,符合山羊鲜精的标准GB20557-2006,适合做精液的低温保存。接着做了精液低温保存的动物源稀释液效果检测以及添加维生素B12后的影响,稀释液是以Tris-柠檬酸-果糖-葡萄糖为基础液,通过添加15%卵黄液与基础液进行对比,结果保存的有效天数为6天显著高于基础液(p0.05),质膜完整率第6天能达到30.91±3.27%,也显著高于对照组(p0.05)。添加维生素B12之后精子活力显著提高,第7天能达到30.94±5.41(p0.05),精子直线速率(SVL)在精子活力为30%时,速率为56±4.48μm/s显著高于对照组的34±5.50μm/s(p0.05)。然后对低温保存过程的改良,主要是通过减缓降温速度、离心去除精清、微量换液重悬浮,检验是否有助于延长保存时间,最终有效保存时间从6天延长到8天差异显著(p0.05)。最后检测了精液低温保存无动物源稀释液的效果以及添加牛磺酸后的影响。结果含有PVA的稀释液有效保存时间为4天,添加牛磺酸后延长到5天,另外对精子的质膜完整率、顶体完整率和MDA含量、总抗氧化能力(T-AOC活力)进行对比,加入牛磺酸后都有显著差异(p0.05),这说明牛磺酸在奶山羊精液低温液态保存时有一定的保护作用。
【关键词】：奶山羊 精液 低温保存 VB12 牛磺酸
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S827
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-11
• 文献综述11-25
• 引言11-12
• 第一章 精液保存的生理依据12-17
• 1.1 公羊的生殖器官与精液12-14
• 1.1.1 生殖器官组成与功能12
• 1.1.2 精子的生成与结构12-13
• 1.1.3 精液的组成13-14
• 1.1.4 影响精子的因素14
• 1.2 受精14-17
• 1.2.1 精子和卵子的运动14-16
• 1.2.2 精子和卵子受精前的准备16
• 1.2.3 受精过程16-17
• 第二章 人工授精的研究进展17-20
• 2.1 人工授精的意义17
• 2.2 发展概况17-18
• 2.3 人工授精发展的技术支撑18-20
• 2.3.1 采精技术18
• 2.3.2 稀释液的开发18
• 2.3.3 抑菌药物18
• 2.3.4 输精方法18
• 2.3.5 低温设备18
• 2.3.6 制作工艺的改进18-20
• 第三章 精液稀释的研究进展20-25
• 3.1 精液品质检查20-21
• 3.1.1 外观评定20
• 3.1.2 显微镜检查20-21
• 3.1.3 生化指标检查21
• 3.1.4 其他检查21
• 3.2 精液稀释液分类21
• 3.3 精液稀释液的成分和作用21-23
• 3.3.1 营养物质22
• 3.3.2 保护剂22-23
• 3.3.3 其它添加剂23
• 3.4 精液低温保存的影响因素23-25
• 3.4.1 稀释液的配置23-24
• 3.4.2 精清的去除24
• 3.4.3 稀释倍数和方法24-25
• 研究的目的和意义25-26
• 试验研究26-54
• 第四章 西农萨能奶山羊精液品质检测26-32
• 4.1 材料与方法26-27
• 4.1.1 试验材料26
• 4.1.2 试验方法26-27
• 4.1.3 数据处理27
• 4.2 结果27-30
• 4.3 讨论30-31
• 4.4 小结31-32
• 第五章 含卵黄稀释液添加维生素B12的保存效果32-40
• 5.1 材料与方法32-34
• 5.1.1 试验材料32-33
• 5.1.2 试验方法33-34
• 5.2 结果34-38
• 5.2.1 精子活力34-35
• 5.2.2 精子直线运动速率35-37
• 5.2.3 精子质膜完整性37-38
• 5.3 讨论38-39
• 5.4 小结39-40
• 第六章 奶山羊精液低温保存方法改良40-45
• 6.1 材料与方法41-42
• 6.1.1 试验材料41
• 6.1.2 试验方法41
• 6.1.3 测定指标41-42
• 6.2 结果42-44
• 6.2.1 降温速度42
• 6.2.2 精子的活率42-44
• 6.3 讨论44
• 6.4 小结44-45
• 第七章 无动物源稀释液的保存效果及添加牛磺酸的影响45-54
• 7.1 材料与方法45-47
• 7.1.1 试验材料45-46
• 7.1.2 试验方法46-47
• 7.2 结果47-51
• 7.2.1 无动物源稀释液的保存效果47
• 7.2.2 牛磺酸对羊精子活力、顶体完整率和质膜完整率的影响47-50
• 7.2.3 牛磺酸对羊精液中MDA含量及T-AOC浓度的影响50-51
• 7.3 讨论51-53
• 7.3.1 无动物源配方对奶山羊精子活力、顶体完整率和质膜完整率的效果51-52
• 7.3.2 加入牛磺酸对奶山羊精液中MDA含量及T-AOC浓度的影响52-53
• 7.4 小结53-54
• 结论54-55
• 参考文献55-59
• 附录59-67
• 附录1 人工采精方法59-60
• 附录2 精子各指标检测方法60-61
• 附录3 稀释液的配置原则61-62
• 附录4 稀释操作和倍数制定62-63
• 附录5 丙二醛（MDA）试剂盒使用步骤63-64
• 附录6 总抗氧化能力（T-AOC）测试盒使用步骤64-65
• 附录7 试剂和仪器65-66
• 附录8 图片66-67
• 致谢67-68
• 作者简介68

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