山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

发布时间：2017-09-11 16:00

  本文关键词：山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

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【摘要】：为获得纯化的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)表面蛋白(surface protein,SU protein)和抗SU蛋白的多克隆抗体,根据Gen Bank已登录的ENTV Shaanxi株SU基因序列,设计合成1对特异性引物,PCR扩增SU基因并将其连接于原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组质粒p ET-28a-SU,经鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为43 ku的重组蛋白。将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化、复性后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western-blot分析结果表明,原核表达纯化的SU蛋白能够与制得的小鼠抗SU蛋白多克隆抗体特异性结合。上述结果表明,本试验成功获得了纯化的ENTV SU蛋白和小鼠抗ENTV SU蛋白的多克隆抗体,为进一步研究SU蛋白在ENTV感染过程中的作用和建立诊断方法提供了材料。
【作者单位】： 西北农林科技大学动物医学院;
【关键词】： 山羊地方性鼻内肿瘤病毒 SU蛋白 原核表达 纯化 多克隆抗体
【基金】：陕西省农业科技创新与攻关项目(2016NY-092) 陕西省重点产业创新链项目(2016KTZDNY02-06) 西北农林科技大学大学生创新创业训练计划项目(201610712019)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumorvirus of goats,ENTV)属于反转录病毒科、β反转录病毒属,可引起山羊鼻内出现单侧或双侧性肿瘤。受感染的山羊表现为呼吸困难,运动时流大量鼻液,食欲减退,消瘦,静卧,不愿运动,直至肿瘤堵死鼻腔无法呼吸最终死亡[1-2]。外科手术摘

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本文编号：831667