一种高产组织芯片制作方法的建立、应用与转化

发布时间：2017-10-10 06:49

  本文关键词：一种高产组织芯片制作方法的建立、应用与转化

  更多相关文章： 组织芯片 高产量 肿瘤研究 乳腺肿瘤 食管肿瘤 甲状腺转录因子-1 神经内分泌癌

【摘要】：第一部分一种高产组织芯片技术的建立背景 组织芯片(tissue chip),又称组织微阵列(tissue microarray,TMA)是一种高通量、多样本的分析工具。然而传统组织芯片受原始蜡块厚度的限制,产量有限。因此,我们致力于建立一种高产的组织芯片制作方法。目的建立一种高产的组织芯片技术。材料和方法 1)选择复旦大学附属中山医院病理科2001年1月-2012年7月胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)标本150例。 2)利用我们建立的组织芯片制作技术分别制作了含70例GSIT的组织芯片蜡块和GIST耐药标本组织芯片蜡块,并进行CD117免疫组织化学染色和c-KIT、PDGFRα基因检测。 3)利用我们建立的方法和传统组织芯片制作技术制作一混合组织芯片,连续切片并记录各芯条脱失时的芯条张数。 结果 1)在70例GIST组织芯片中,组织芯条排列整齐,无移位,无缺失,组织代表性好,蛋白保存完整,基因信息未丢失。 2)在20例GIST混合组织芯片中,传统组织芯片技术制作区域产量(100张)；而新方法制作的组织芯片区域产量可达1500张。 3)在GIST耐药标本组织芯片中,高产组织芯片技术可以实现再次向组织芯片蜡块中增加样本,二次成型,甚至多次成型。 4)在高产组织芯片制作中,我们申请了相关专利8项,己授权5项。 结论 1)高产组织芯片制作方法步骤简单,摒弃了昂贵的组织芯片点样仪设备和繁琐的接种步骤。 2)高产组织芯片蜡块可完好保存蛋白和基因等信息。 3)相对于传统组织芯片制作方法,本方法能够获得更大的组织芯片产量。 第二部分高产组织芯片技术的应用 一、应用高产组织芯片技术研究甲状腺转录因子-1在乳腺癌中的表达及意义 目的 甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1, TTF-1)主要表达于甲状腺癌和肺腺癌,常作为发生在这些部位肿瘤的辅助诊断指标。本研究筛查TTF-1在乳腺癌中的表达状况,讨论其病理诊断及鉴别诊断意义。 方法 制备含70例乳腺癌标本的组织芯片,用免疫组织化学方法检测TTF-1的表达状况。 结果 70例乳腺癌组织芯片标本中,2例表达TTF-1,阳性率为2.9%,阳性定位于细胞核,均为弥漫强阳性。其中1例为浸润性导管癌2级,1例为浸润性小叶癌。结论 乳腺癌中可出现TTF-1的表达,虽然发生率低,但是在肿瘤中出现TTF-1阳性表达并不能除外乳腺癌的可能,在日常病理工作中尤其是在判断转移性肿瘤原发部位时,需要引起注意。 二、应用高产组织芯片技术进行原发性食管神经内分泌癌的免疫组织化学研究 目的 探索新的食管神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma, NEC)辅助诊断指标。 方法 用高产组织芯片技术制作食管NEC组织芯片,同时制作食管鳞状细胞癌组织芯片用作对照,然后进行免疫组织化学指标P63、HCK、CHG、CD56、SYN、 TTF-1、SSR2、SSR5、P16、CD117等的检测。 结果 1)P16均为100%弥漫强阳性表达。 2)TTF1-只在神经内分泌癌中表达(60%),而CDl17在SCC伴NED和SCC中可有表达(40%,5.3%),但在阳性率及阳性范围、阳性强度均不及NEC(95%)。 3)SSR2在食管NEC、SCC伴NED、SCC三组中的阳性率分别为40%、40% 和19.3%,SSR5在食管NEC、SCC伴NED、SCC三组中的阳性率分别为70%、70%、15.8%。 结论 1) P16均为100%弥漫强阳性表达,无鉴别诊断价值。 2) TTF-1、CD117可作为食管SCC及食管NEC的鉴别诊断指标。 3) SSR2、SSR5在食管NEC、SCC伴NED、SCC三组中均有一定的阳性表达率,为进一步研究生长抑素在食管癌中的抗肿瘤作用提供了理论依据。 第三部分高产组织芯片技术的转化与推广
【关键词】：组织芯片 高产量 肿瘤研究 乳腺肿瘤 食管肿瘤 甲状腺转录因子-1 神经内分泌癌
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R361.2
【目录】：

• 英文缩略语注释3-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-13
• 第一部分 高产组织芯片的建立13-24
• 一、高产组织芯片技术的发明13
• 二、高产组织芯片有效性的验证13-18
• 三、高产组织芯片与传统组织芯片的比较18-21
• 四、高产组织芯片多次接种的研究21-23
• 五、申请专利23-24
• 第二部分 高产组织芯片技术的应用24-38
• 一、高产组织芯片技术研究甲状腺转录因子-1在乳腺癌中的表达及意义24-28
• 背景24
• 材料与方法24-25
• 结果25-26
• 讨论26-28
• 小结28
• 二、高产组织芯片技术在原发性食管神经内分泌癌的免疫组织化学研究28-38
• 背景28
• 材料和方法28-30
• 结果30-34
• 讨论34-37
• 小结37-38
• 第三部分 高产组织芯片技术的转化与推广38-39
• 全文总结39
• 参考文献39-42
• 综述42-51
• 参考文献47-51
• 硕士期间研究成果51-54
• 致谢54-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 Laurine Verset;Marianna Arvanitakis;Patricia Loi;Jean Closset;Myriam Delhaye;Myriam Remmelink;Pieter Demetter;;TTF-1 positive small cell cancers:Don't think they're always primary pulmonary![J];World Journal of Gastrointestinal Oncology;2011年10期

2 张宝燕;李向红;崔海宏;;CD56、嗜铬蛋白A和突触素在小细胞肺癌中的表达及其临床诊断价值[J];诊断病理学杂志;2009年05期

，

本文编号：1004936