m icroRNA-449b对高迁移率族蛋白B1介导树突状细胞功能的影响

发布时间：2017-10-12 19:54

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【摘要】：目的:探讨mi R-449b在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激树突状细胞(DC)中的变化及其对DC免疫功能的影响。方法:分别以10、100、1 000 ng/ml剂量的HMGB1刺激小鼠脾脏来源的CD11c+DC,于48后检测DC表面分子CD80、CD86、MHC-II及细胞内mi R-449b改变;流式细胞仪分析不同剂量HMGB1刺激对DC凋亡的影响。DC转染mi R-449b模拟物(mi R-449b)、抑制物(In-mi R-449b)及相应对照(mi R-NC、In-mi RNC)后,HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h收取细胞,检测DC表面分子、凋亡改变以及与T细胞混合培养后T细胞增殖、分化功能的变化。结果:HMGB1刺激DC后,其表面分子随着剂量的增加表达上调,其中以100 ng/ml组上调最为明显,而大剂量(1 000 ng/ml)时表达有所下调;mi R-449b在48 h 100及1 000 ng/ml HMBG1组表达明显上调(P0.05);随着HMGB1剂量的增加,DC在48 h凋亡逐渐增加(P0.05)。转染mi R-449b可上调其在细胞内表达,而抑制物可抑制其表达;上调mi R-449b后HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h DC表面分子CD86表达显著上调(P0.05)、凋亡增加(P0.01)、对T细胞的共刺激增殖效应减弱、混合性淋巴细胞反应中IL-4水平增多(P0.01)、IFN-γ水平下降(P0.05)。结论:mi R-449b可负性调控HMGB1介导DC免疫功能及促进其凋亡,进而在机体免疫反应障碍过程中发挥调控作用。
【作者单位】： 天津医科大学总医院急诊医学科;解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室;
【关键词】： miR-b 树突状细胞 高迁移率族蛋白 B 免疫功能
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81130035,81372054,81501664) 国家重点基础研究发展计划项目(2012CB518102)
【分类号】：R392
【正文快照】： 程(上海)股份有限公司;SYBR Green荧光定量试剂盒购自美国AB公司;CCK8检测试剂盒购自美国Sigma公司;小鼠IFN-γ、IL-4 ELISA试剂盒购自依科赛生物科技(太仓)有限公司。1.2 HMGB1对DC表面分子表达、DC凋亡及mi RNA-449b表达的影响1.2.1小鼠脾脏来源CD11c+DC的提取颈椎脱臼法处

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本文编号：1020590