内源性硫化氢信号系统在人输卵管组织中的表达及功能研究

发布时间：2017-10-15 05:00

  本文关键词：内源性硫化氢信号系统在人输卵管组织中的表达及功能研究

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【摘要】：背景介绍 硫化氢(Hydrogen sulfide, H2S)被认为是气体递质家族的第三个成员,可参与体内多个生理和病理过程。H2S由L-半胱氨酸(L-cysteine)代谢产生。该代谢过程涉及两个主要的酶,即胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase. CSE)和胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase, CBS)。H2S作为一种新型的内源性信号分子,能够调节血管和气道平滑肌细胞的收缩功能。输卵管也具有自发性舒缩活动,然而目前为止输卵管组织是否存在H2S信号系统还未可知；如果存在,其是否影响输卵管的运动及胚胎在输卵管的转运。在本研究中,我们探讨内源性硫化氢在大鼠、小鼠及人输卵管中的表达、定位以及其功能,以期找到一个调节输卵管运动的新的信号分子,并为输卵管妊娠的发生机制提供一条新思路。 材料与方法 人输卵管组织来源于宫外孕手术、产后出血子宫切除术、产后绝育手术和卵巢癌手术患者的输卵管。Wistar大鼠和BALB/c小鼠均来自于山东大学医学院动物中心。本研究采用蛋白斑点印迹(输卵管组织匀浆后,SDS-PAGE凝胶分离,Western blot检测)、免疫荧光(采用输卵管石蜡切片)、肌张力检测和硫化氢释放试验检测酶活性。BALB/c小鼠、野生型小鼠和CBS(+/-)敲基因小鼠子宫和输卵管的胚胎计数。其中,CBS(+/-)敲基因小鼠为山东大学医学院药理系易凡教授赠与。 结果 在本课题的研究中,首先我们通过免疫荧光及Western blot研究发现CBS和CSE存在于人输卵管的粘膜上皮细胞,输卵管妊娠时其表达明显升高。组织H2S的测定实验进一步证实了输卵管组织能合成释放H2S,且输卵管妊娠病人的输卵管组织H2S含量高于正常妊娠组。功能学研究,离体组织张力测定实验发现外源性或内源性H2S可介导输卵管的自发性收缩。利用药理学及敲基因小鼠体内实验,我们发现在早期妊娠时,CBS来源的H2S信号途径介导胚胎在输卵管的转运；通过药物或者基因工程的方法抑制或者增强硫化氢信号,均可导致胚胎在输卵管滞留。重要的是,给予小鼠外源性硫化氢可明显减轻因抑制内源性硫化氢所引起的胚胎滞留。另外,H2S信号异常还可引起胚胎发育迟缓。 结论 我们的研究结果表明输卵管存在内源性硫化氢信号系统,该系统调节输卵管的自发性收缩。如果输卵管硫化氢信号系统异常或者失调,则会导致胚胎滞留和早期胚胎发育迟缓。总之,通过研究我们发现了输卵管胚胎转运的新的调节机制,这将可能会成为预防和治疗异位妊娠的新靶点。
【关键词】：硫化氢 胱硫醚-β-合成酶 胱硫醚-γ-裂解酶 胚胎转运 异位妊娠
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R339.2
【目录】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 英文缩略词和中文对照10-11
• 第一部分 人输卵管存在硫化氢信号系统11-26
• 前言11-12
• 材料和方法12-18
• 结果18-20
• 附图20-26
• 第二部分 硫化氢调节人输卵管平滑肌的自发性收~.26-37
• 前言26-27
• 材料和方法27-29
• 结果29-31
• 附图31-37
• 第三部分 H_2S信号途径在胚胎转运中的作用37-45
• 前言37
• 材料和方法37-39
• 结果39-41
• 附图41-45
• 讨论45-48
• 参考文献48-56
• 致谢56-58
• 在读期间发表的论文58-59
• 学位论文评阅及答辩情况表59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 伍蕊;姚婉贞;陈亚红;耿彬;唐朝枢;;支气管哮喘患者血浆中硫化氢的变化及其意义[J];北京大学学报(医学版);2008年05期

2 ;Localization of cystathionine β synthase in mice ovaries and its expression profile during follicular development[J];Chinese Medical Journal;2006年22期

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本文编号：1035189