维生素C对TNF-α及血清剥夺诱导的人髓核细胞凋亡的作用

发布时间：2017-10-16 13:17

  本文关键词：维生素C对TNF-α及血清剥夺诱导的人髓核细胞凋亡的作用

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【摘要】：目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清剥夺组(C组),每组再分为以下亚组:A组分为A1组(基础培养液)、A2组(100μg/m L Vit C)、A3组(200μg/m L Vit C);B组分为B0组(对照组)、B1组(100 ng/m L TNF-α)、B2组(100μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α)、B3组(200μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α);C组分为C0组(对照组)、C1组(FBS浓度由8%降低为2%)、C2组(2%FBS+100μg/m L Vit C)、C3组(2%FBS+200μg/m L Vit C)。各组作用24 h后,采用流式细胞术检测各组膜联蛋白V、碘化丙啶双染后髓核细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测p53(基因编码相对分子质量为53×103的蛋白质)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Sox9和糖胺多糖(Aggrecan)m RNA表达。结果 A组:与A1组比较,A2、A3组的Vit C均能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05),但A2、A3组间比较差异无统计学意义(P0.05);A2、A3组的Vit C可促进髓核细胞Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Sox9 m RNA表达,且A3组促进作用显著大于A2组(P0.05)。B组:与B0组比较,B1组TNF-α促进了髓核细胞凋亡,增加了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05);与B1组比较,B3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而B2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,差异均有统计学意义(P0.05)。C组:与C0组比较,C1组2%FBS能诱导髓核细胞凋亡,但降低了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05);与C1组比较,C3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而C2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS m RNA表达,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Vit C能延缓或降低髓核细胞凋亡、促进细胞外基质合成与分泌,200μg/m L Vit C可延缓或降低100 ng/m L TNF-α和2%FBS诱导的凋亡,而100μg/m L Vit C则促进其诱导的凋亡。
【作者单位】： 暨南大学医学院第四附属医院;广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所;广州市红十字会医院骨科;广州市红十字会医院;西澳大利亚大学外科学院病理学和医学实验室;
【关键词】： 维生素C 髓核细胞 TNF-α 血清剥夺 细胞凋亡 椎间盘退变
【基金】：广东省科技厅一般引导项目(2012B031800338、2013B021800042、2013B021800070) 广州市科技计划项目(2013J4100099、2013J4100100、2014J4100075) 广州市医药科技一般引导项目(20121A011046、20131A010007) 国家自然科学基金资助项目(81272222、81228013) 广东省自然科学基金(S2013010015184)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 椎间盘是人体最大的无血运组织,主要靠其上下的软骨终板渗透等被动扩散方式获得营养,营养相对缺乏,且髓核细胞自我修复能力低。目前研究表明[1],椎间盘退变是多种因素协同作用的结果,多因素作用下髓核细胞的过度凋亡使得细胞外基质合成减少和成分改变,从而导致椎间盘发生退行

【参考文献】

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9 陈，

本文编号：1042883