贵州小型猪胆汁淤积性肝纤维化模型的建立

发布时间：2017-10-16 23:01

  本文关键词：贵州小型猪胆汁淤积性肝纤维化模型的建立

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【摘要】：目的：通过结扎胆总管建立贵州小型猪的胆汁淤积性肝纤维化模型；观察模型动物的肝脏功能变化和肝组织病理学变化，探讨Fas蛋白在其细胞中的表达和机制。方法：8头体重12-15kg的雌性贵州小型猪，3%戊巴比妥（1ml/kg）腹腔内注射麻醉，剖腹显露胆总管并游离，双线结扎胆总管，并于两线间离断胆总管，建立动物模型。分别于术前30min、术后7天、术后14天、术后28天采取血样，检测肝功能、血常规和凝血功能；在胆总管结扎前、术后7天、术后14天、术后28天取肝组织活检行光镜和电镜检查；免疫组化检测Fas在各时段标本中的表达情况，Tunel原位法检测细胞凋亡情况。结果：通过此方法成功建立起猪的胆汁淤积性肝纤维化模型。2头猪分别在1周、3周时因肝功能衰竭死亡，剩余6头存活至4周经切开腹主动脉放血处死，，存活猪均出现不同程度肝纤维化。在结扎后28天内，与术前相比，血清学指标谷草转移酶（AST）在术后7天即达到一个较高的值（394.2±124.8U/L），与术前（139.8±66.9U/L）相比具有明显差异（P0.01），并在随后呈逐步增加的趋势，谷丙转氨酶（ALT）在术后7天升高（65.0±1.6U/L），与术前（46.35±1.4U/L）相比具有明显差异（P0.01）；血清总蛋白、白蛋白在术后28天里缓慢下降，与术前相比有明显差异（P0.01）；总胆红素（TBIL）和直接胆红素（DBIL）含量也从术后7天开始持续升高（分别为111.4±11.0umol/L和93.2±8.2umol/L），与术前（分别为3.1±1.7umol/L和1.4±0.6umol/L）相比有明显差异（P0.01）；碱性磷酸酶（ALP）从术后7天即开始持续升高(599.3±64.0U/L)，与术前（161.5±21.4U/L)相比有明显差异（P0.01)；白细胞（WBC）在术后7天即升高（30.0±5.7×10E9/L），与术前（11.7±1.8×10E9/L）相比差异明显（P0.01），红细胞（RBC）与血红蛋白（HGB）在术后28天里缓慢下降，与术前相比有差异（P0.05）；凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）及纤维蛋白原（DFbg）在术后28天里缓慢下降，与术前相比有明显差异（P0.01）；光镜提示在术后的28天里，肝小叶结构逐渐破坏，小叶间纤维增生、排列紊乱；电镜提示在术后28天里，肝细胞内出现大量脂滴，粗面内质网消失，核周隙增宽，核膜皱缩，线粒体水肿；病理检测及免疫组化显示：在胆总管结扎术后7天的切片中，肝细胞主要以坏死为主，随着时间推移，肝细胞凋亡增多，Fas表达增加，肝纤维化程度加重。结论：通过结扎胆总管可成功建立猪的胆汁淤积性肝纤维化模型；其机制与Fas表达增加，促进肝细胞凋亡有关。
【关键词】：肝纤维化 胆汁淤积 猪 模型 细胞凋亡
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R575.2;R-332
【目录】：

• 目录3-4
• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-10
• 材料与方法10-17
• 结果17-26
• 讨论26-29
• 结论29-30
• 参考文献30-31
• 英汉缩略词对照表31-32
• 致谢32-33
• 综述33-48
• 参考文献43-48
• 读书期间发表文章48-49

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本文编号：1045364