UBM材料上的Laminin蛋白促进负载骨髓间充质干细胞增殖和平滑肌分化

发布时间：2017-10-17 22:47

  本文关键词：UBM材料上的Laminin蛋白促进负载骨髓间充质干细胞增殖和平滑肌分化

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【摘要】：目的探讨猪膀胱细胞外基质(urinary bladder matrix,UBM)上的Laminin蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和向平滑肌分化的影响。方法采用机械分离法、酶消化法及冷冻干燥法等方法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理,采用蛋白与支架共孵育,制备出UBM+Laminin及UBM+Anti-Laminin复合支架。采用贴壁法培养BMSCs,流式细胞仪鉴定BMSCs。采用P3代BMSCs,分别接种于UBM+Laminin、UBM及UBM+Anti-Laminin上。采用CCK-8检测、HE染色观察及免疫组化鉴定等方法检测Laminin蛋白对BMSCs增殖、迁移和分化的影响。结果流式细胞仪鉴定BMSCs CD29阳性表达率为98%,CD31阳性表达率为4.56%,CD34阳性率为3.30%。3种材料均能支持BMSCs生长,且随共孵育时间的延长,D(450)值逐渐升高,其中UBM+Laminin复合材料组细胞D(450)最高(P0.01)。HE染色结果显示UBM+Laminin组细胞接种第3天形成黏附层,并向深部迁移,第14天可达材料致密层;UBM组第7天仅少许细胞向深层迁移,第14天未达基底层;UBM+Anti-Laminin组仅在支架表层生长。免疫组化检测显示UBM+Laminin组、UBM组、UBM+Anti-Laminin组细胞α-SMA表达分别呈阳性、弱阳性和阴性。结论 UBM材料上Laminin蛋白能促进负载BMSCs增殖、迁移、并有诱导其向平滑肌方向分化的作用。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院妇产科;第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所;重庆市妇幼保健医院妇产科;
【关键词】： 脱细胞膀胱 骨髓间充质干细胞 Laminin蛋白 细胞增殖 细胞分化
【基金】：国家自然科学基金(81270683)~~
【分类号】：R318.08;R329.2
【正文快照】： 医学部全军免疫学研究所2;400013重庆,重庆市妇幼保健医院妇产科3)压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的发病机制主要与尿道内平滑肌和横纹肌的减少有关。临床上治疗SUI的最佳治疗手段是运用组织替代物进行盆底修复[1],目前用于盆底修复的组织工程支架包括合成聚

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本文编号：1051490