不同饱和度的单纯甘油酯对动脉粥样硬化模型的平滑肌细胞功能的影响
发布时间：2017-10-20 08:34
本文关键词：不同饱和度的单纯甘油酯对动脉粥样硬化模型的平滑肌细胞功能的影响
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【摘要】：心血管疾病是目前威胁全世界人类健康的一类重大疾病,动脉粥样硬化(AS)是心血管疾病中常见的最重要的一种,在动脉粥样硬化的发生机制中,炎症反应起着重要作用。氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞功能紊乱和平滑肌细胞(SMC)增生,促进炎症反应被认为是参与动脉粥样硬化发生的重要危险因素。动脉粥样硬化的形成和脂肪酸的摄入量与种类有很大的关系。诸多研究表明甘油三酯与心血管疾病的发生发展息息相关,特别是动脉粥样硬化。 本研究采用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)建立动脉粥样硬化细胞模型,探讨三硬脂酸甘油酯、三油酸甘油酯和三亚油酸甘油酯对被诱导细胞功能的影响。用MTT法测定平滑肌细胞的增殖,采用划线伤口愈合法测定平滑肌细胞迁移能力,通过绘制细胞生长曲线,观察不同饱和度的单纯甘油酯对ox-LDL诱导平滑肌细胞增殖与迁移的影响。用Western Blotting法测定不同甘油三酯对平滑肌细胞中PCNA、SM-α-actin、MCP-1蛋白表达的影响和荧光定量PCR测定甘油三酯对平滑肌细胞中的PCNA、SM-α-actin、MCP-1基因的表达的影响,探讨酰化位置不同的甘油三酯对动脉粥样硬化的影响机制。主要研究结果如下： 1.三硬脂酸甘油酯对经过ox-LDL诱导增殖的SMC有促进增殖作用,促进率随时间的增加而增加,并与甘油三酯浓度成正相关；三油酸甘油酯和三亚油酸甘油酯对经过ox-LDL诱导增殖的SMCs有抑制增殖作用,抑制率随时间的延长而增加,抑制率在浓度为50-500μmol/L范围内与药物浓度均呈正相关。 2.三硬脂酸甘油酯使SMC中SFA含量显著增多,MUFA和PUFA含量显著减少,n-3和n-6脂肪酸含量相应减少。三油酸甘油酯使SMC中SFA含量稍有升高,MUFA含量显著增高,PUFA含量减少,n-3和n-6脂肪酸含量无显著性变化。三亚油酸甘油酯使SMC中SFA含量显著减少,MUFA含量无明显变化,PUFA含量显著增高,n-3和n-6脂肪酸含量增高。 3.三硬脂酸甘油酯对经过ox-LDL诱导的平滑肌细胞迁移有着促进作用,三油酸甘油酯和三亚油酸甘油酯对经过ox-LDL诱导的平滑肌细胞迁移有抑制作用,三亚油酸甘油酯抑制作用稍弱于三油酸甘油酯。 4.三种单纯甘油酯作用于ox-LDL诱导的SMCs,使与细胞增殖、细胞周期等有关的蛋白表达发生变化。与ox-LDL组相比,三硬脂酸甘油酯使PCNAMCP-1两种蛋白表达上调,其mRNA表达也上调,而SM-a-actin的蛋白和mRNA表达下降。而三油酸甘油酯或三亚油酸甘油酯,使PCNA、MCP-1两种蛋白表达下调,其mRNA表达也下调,但是SM-a-actin蛋白和基因表达都上调。 实验结果表明,三硬脂酸甘油酯对ox-LDL诱导平滑肌细胞的增殖与迁移有着明显的促进作用,诱导作用呈现时间和剂量的依赖关系,对动脉粥样硬化进程有一定的促进作用。而三油酸甘油酯和三亚油酸甘油酯可以抑制ox-LDL诱导增殖的平滑肌细胞增殖,减少细胞迁移距离,对动脉粥样硬化进程有一定抑制作用。
【关键词】：三硬脂酸甘油酯 三油酸甘油酯 三亚油酸甘油酯 人脐静脉平滑肌细胞 氧化型低密度脂蛋白
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R541.4;R-332
【目录】：
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-7
- 缩略饲7-11
- 第1章 引言11-27
- 1.1 概述11
- 1.2 AS发病机制11-18
- 1.2.1 AS发病机制11-13
- 1.2.2 甘油三酯含量与AS13-14
- 1.2.3 脂肪酸饱和度与AS14-16
- 1.2.4 SN与AS16-17
- 1.2.5 ox-DL与AS17-18
- 1.3 甘油三酯18-20
- 1.3.1 三硬脂酸甘油酯18-19
- 1.3.2 三油酸甘油酯19
- 1.3.3 三亚油酸甘油酯19-20
- 1.4 相关蛋白20-25
- 1.4.1 PCNA20-23
- 1.4.2 MCP-123-24
- 1.4.3 SM-α-actin24-25
- 1.5 课题来源及研究目的25-27
- 1.5.1 课题来源25
- 1.5.2 研究目的25-26
- 1.5.3 研究内容26-27
- 第2章 AS模型建立与甘油三酯对HUVSMC增殖的影响27-38
- 2.1 前言27
- 2.2 试剂与实验设备27-28
- 2.2.1 试验材料27-28
- 2.2.2 设备28
- 2.3 实验方法28-31
- 2.3.1 细胞培养28-29
- 2.3.2 ox-LDL添加浓度的确定29-30
- 2.3.3 甘油三酯对细胞增殖影响30-31
- 2.3.4 细胞生长曲线的绘制31
- 2.3.5 统计学分析31
- 2.4 实验结果31-36
- 2.4.1 不同浓度ox-LDL与细胞生长关系31-32
- 2.4.2 甘油三酯对HUVSMC生长的影响32-34
- 2.4.3 甘油三酯对ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖的作用34-35
- 2.4.4细胞生长曲线35-36
- 2.5 讨论36-37
- 2.5.1 动脉粥样硬化模型的建立36
- 2.5.2 ox-LDL对SMC增殖的影响36
- 2.5.3 不同甘油三酯对模型中SMC增殖的影响36-37
- 2.6 小结37-38
- 第3章 甘油三酯对HUVSMC脂肪酸组成和迁移的影响38-46
- 3.1 前言38-39
- 3.2 试剂与实验设备39-40
- 3.2.1 试验材料39
- 3.2.2 设备39-40
- 3.3 实验方法40-41
- 3.3.1 不同甘油三酯对SMC脂肪酸组成的影响40-41
- 3.3.2 不同甘油三酯对平滑肌迁移影响41
- 3.4 结果41-44
- 3.4.1 不同甘油三酯对SMC脂肪酸组成的影响41-43
- 3.4.2 不同甘油三酯对SMC迁移的影响43-44
- 3.5 讨论44-45
- 3.5.1 甘油三酯对SMC脂肪酸组成的影响44-45
- 3.5.2 甘油三酯对SMC迁移的影响45
- 3.6 小结45-46
- 第4章 甘油三酯对SMC增殖与迁移相关蛋白及基因的影响46-58
- 4.1 前言46-47
- 4.2 试剂与实验设备47-48
- 4.2.1 试验材料47
- 4.2.2 设备47-48
- 4.3 实验方法48-53
- 4.3.1 Western Blotting测定相关蛋白48-50
- 4.3.2 RT-PCR测定相关基因50-53
- 4.4 实验结果53-56
- 4.4.1 Western Blotting测定甘油三酯对SMC增殖与迁移蛋白的影响53
- 4.4.2 RT-PCR测定甘油三酯对SMC增殖与迁移相关基因的影响53-56
- 4.5 讨论56-57
- 4.5.1 不同甘油三酯对PCNA蛋白表达的影响56
- 4.5.2 不同甘油三酯对MCP-1蛋白表达的影响56-57
- 4.5.3 不同甘油三酯对SM-α-actin蛋白以及基因表达的影响57
- 4.6 小结57-58
- 第5章 结论与展望58-60
- 5.1 结论58-59
- 5.1.1 甘油三脂对SMC增殖与迁移影响58
- 5.1.2 甘油三酯对SMC脂肪酸组成的影响58
- 5.1.3 甘油三酯对周期、迁移及形态相关蛋白及基因的影响58-59
- 5.2 进一步工作方向59-60
- 致谢60-61
- 参考文献61-68
- 攻读学位期间的研究成果68
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡友军,伍庆斌;脂肪营养与脂肪酸酰化位置关系的研究进展[J];国外畜牧科技;2000年03期
2 李运珊;植物油对血脂和动脉粥样硬化的影响综述[J];海南大学学报(自然科学版);1994年03期
3 揭红波;;浅谈心血管疾病的发病机理与预防[J];中外医疗;2011年12期
4 江渝,刘秉文,范萍,刘宇,张荣爵;内源性高甘油三酯血症患者体内存在氧化型低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和高密度脂蛋白[J];中国动脉硬化杂志;1997年02期
5 郭素芬;李志强;李静;王玉梅;;黑木耳多糖对动脉粥样硬化形成中平滑肌细胞增殖的影响[J];中国动脉硬化杂志;2006年09期
6 佟志刚;;反式脂肪酸与心血管相关疾病关系的研究现状[J];实用临床医学;2010年06期
7 林e，
本文编号：1066284
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