百日咳毒素参考品的制备及鉴定

发布时间：2017-10-22 16:19

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【摘要】：目的制备百日咳毒素(pertussis toxin,PT)参考品,并进行鉴定。方法将百日咳杆菌培养上清经珍珠岩和羟基磷灰石两步吸附层析纯化后获得PT,进行SDS-PAGE、ELISA、斑点免疫印迹及血凝效价检测。结果纯化后PT纯度可达99%以上;相同抗原含量的纯化后PT和NIBSC标准品与PT单克隆抗体均为阳性反应,与FHA单克隆抗体均为阴性反应;纯化后PT和NIBSC标准品均可与PT单克隆抗体产生明显的反应斑点,与FHA单克隆抗体无反应斑点,Sigma公司PT参考品与PT单克隆抗体有明显反应斑点,与FHA单克隆抗体有微弱反应斑点;纯化后PT和Sigma公司PT参考品的血凝效价分别为1∶32和1∶64。结论成功制备了较高纯度的PT,有望作为参考品用于PT抗原含量检测、抗PT血清抗体滴度检测及抗原纯度检测。
【作者单位】： 武汉生物制品研究所有限责任公司;长春长生生物科技股份有限公司;中国食品药品检定研究院;中国生物技术股份有限公司;
【关键词】： 百日咳毒素 参考品
【分类号】：R392
【正文快照】： 百日咳毒素(pertussis toxin,PT)是目前国际上公认的百日咳杆菌的保护性抗原,在百日咳疫苗免疫中起关键作用,是百日咳疫苗的重要组分[1]。PT是一个六聚体蛋白分子,由S1、S2、S3、S5及2个S4共6个亚单位组成,其中S1亚基为生物活性亚基。我国目前使用的无细胞百白破疫苗(DTa P)即

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本文编号：1079150