沉默Dnmt1基因表达诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

发布时间：2017-10-23 05:18

  本文关键词：沉默Dnmt1基因表达诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

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【摘要】：骨髓间充质干细胞(MSCs)具有向心肌样细胞分化的潜能.本室前期研究发现,MSCs在体外经DNA甲基转移酶(Dnmt)抑制剂5-氮胞苷诱导可分化为心肌样细胞.本研究证明,沉默DNA甲基化转移酶1(Dnmt1)基因表达,可诱导大鼠MSCs向心肌样细胞分化.本文采用表达Dnmt1 siRNA慢病毒感染MSCs,沉默Dnmt1表达.DNA甲基化分析显示,随着沉默Dnmt1时间延长(7-28 d),Gata-4基因上游DNA调控序列的Cp G甲基化水平明显降低,而Gata-4 mRNA的转录水平明显上调,说明敲减Dnmt1表达导致Gata-4基因激活.蛋白质印迹和/或免疫细胞化学揭示,与对照组比较,心肌相关基因MHC和c Tn T表达上调,而骨髓干细胞标志物CD90和CD29随转染时间延长表达下调.同时,实时定量PCR显示,心肌早期发育调控基因Nkx2.5 mRNA水平与Gata-4 mRNA相同,随表达Dnmt1 siRNA的慢病毒感染而上调.上述结果提示,敲减Dnmt1可降低心肌发育调控基因Gata-4启动子Cp G岛的甲基化水平,上调Gata-4基因的表达,诱导骨髓间充质干细胞向心肌样分化.
【作者单位】： 重庆医科大学附属永川医院儿科;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 心肌 分化 DNA甲基转移酶
【基金】：重庆市卫生局重点项目(No.2011-1-082)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 重庆市卫生局重点项目(No.2011-1-082)*联系人Tel:13594016166;E-mail:gflinda@163.com*Corresponding author Tel:13594016166;E-mail:gflinda@163.com骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源于中胚层,其具有潜能分化成软骨细胞、骨骼肌细胞、肌腱细胞、心肌细胞

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本文编号：1081768