中华按蚊不同种群溴氰菊酯抗性生测及机制初步研究

发布时间：2017-10-23 05:22

  本文关键词：中华按蚊不同种群溴氰菊酯抗性生测及机制初步研究

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【摘要】：疟疾是一种由疟原虫引起的潜在致命性疾病,严重影响人类身体健康。在我国大部分地区的疟疾得到了有效的控制,但云南省、海南省等地区仍有疫情发生。在过去几年中,疟疾疫情有所增长,主要原因：一方面疟原虫对最常用治疗药物抗性的增强；另一方面传疟媒介按蚊种群对化学杀虫剂产生了抗性。溴氰菊酯是目前杀虫剂中活性最高的杀虫剂之一,具有高效、低毒、低残留、易降解等优点,广泛应用于媒介蚊虫的控制。近年来,世界各地抗性监测显示,多种媒介蚊虫对溴氰菊酯均产生了不同程度的抗性。中华按蚊是我国按蚊中的优势蚊种,也是我国以及东南亚地区间日疟的主要传媒,控制其数量是防治疟疾传播的有效方法。关于中华按蚊种群对溴氰菊酯产生抗性已有报告,但目前仍缺少对其抗性的系统调查以及抗性机制的研究。 本研究以六个野外中华按蚊种群和本实验室饲养种群为材料,采用WHO药膜接触方法进行生物抗性检测。并对杀虫剂代谢相关酶GSTs、P450s活性及杀虫剂靶标位点kdr基因突变情况进行分析。研究结果如下： ①抗性生测结果 重庆市璧山县和秀山县中华按蚊种群校正死亡率分别为32.72%和12.62%；云南省元阳县和勐腊县校正死亡率分别为29.63%和38.31%;湖北武穴市和湖南省浏阳市校正死亡率分别为15.34%和12.88%；实验室饲养种群校正死亡率为98.95%。结果表明,六个检测点均为抗性种群,实验室饲养种群为敏感种群。 ②代谢酶活检测结果 勐腊、元阳和实验室种群GSTs酶活没有显著性差异(F=0.297,P0.05),而秀上、璧山、浏阳和武穴检测点GSTs活性均显著高于实验室种群(F=36.743, P0.001)。结果显示,秀山、璧山、浏阳和武穴中华蚊蚊对溴氰菊酯的抗药性与GSTs活性的增强有关。 浏阳、武穴、秀山、璧山和实验室种群P450s酶活没有显著性差异(F=0.691,P0.05),而勐腊和元阳两个种群P450活性均显著高于实验室敏感种群(F=21.723,O0.001)。勐腊和元阳中华蚊对溴氰菊酯的抗药性与P450s活性的增强有关。 ③kdr基因突变分析结果 序列分析表明,璧山种群中检测到一个kdr基因突变类型(TTG→TTT),秀山、武穴市和浏阳检测到两种突变类型(TTG→TTT/TTC和TTG→TGT),勐腊、元阳和实验室饲养种群中未检测到突变。统计分析显示,璧山种群突变基因型TTT与抗性性状间无关联(x2=0.2,P=0.6547),秀山突变基因型TTT与TGT均与抗性性状间无关联(TTT:x2=0.30,P=0.4166；TGT:x2=0.30,P=0.3833)。武穴、浏阳感性蚊虫突变频率显著低于抗性蚊(t=7.79,P0.01),该地区中华按蚊kdr突变与溴氰菊酯抗性有密切的关系。
【关键词】：中华按蚊 溴氰菊酯抗性 GSTs P450s kdr基因
【学位授予单位】：重庆师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R384.1
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 1 绪论10-21
• 1.1 研究背景10-11
• 1.2 疟疾传播媒介及其控制11-13
• 1.2.1 中国主要传疟媒介按蚊种类11-12
• 1.2.2 疟疾的控制12-13
• 1.3 我国媒介蚊虫抗性现状13
• 1.4 昆虫抗性机理及其研究进展13-18
• 1.4.1 代谢抗性15-16
• 1.4.2 靶标抗性16-18
• 1.4.3 行为抗性18
• 1.5 蚊虫抗性检测技术18-20
• 1.5.1 抗性生测方法18-19
• 1.5.2 生化检测方法19
• 1.5.3 分子检测技术19-20
• 1.6 本研究目的和意义20-21
• 2 材料与方法21-28
• 2.1 蚊虫采集点21-22
• 2.2 仪器和设备22-23
• 2.3 所用试剂和试剂盒23-24
• 2.4 蚊虫采集与饲养24
• 2.5 中华按蚊抗性生测24
• 2.6 代谢酶活检测24-26
• 2.6.1 试剂配制24-25
• 2.6.2 实验蚊虫准备25
• 2.6.3 GSTs活性检测25
• 2.6.4 P450s活性检测25-26
• 2.7 kdr基因突变检测26-27
• 2.7.1 蚊虫DNA提取26
• 2.7.2 蚊种分子鉴定26
• 2.7.3 kdr片段扩增26-27
• 2.8 数据处理27-28
• 3 结果与分析28-38
• 3.1 中华按蚊抗性生测结果28-30
• 3.2 代谢酶活检测结果30-32
• 3.2.1 GSTs酶活检测结果30
• 3.2.2 P450酶活检测结果30-32
• 3.3 分子检测结果32-38
• 3.3.1 分子鉴定和Kdr基因的扩增32-33
• 3.3.2 突变检测结果及其分析33-35
• 3.3.3 Kdr基因突变与抗性关系35-38
• 4 讨论38-42
• 4.1 中华按蚊抗性生测时间、测试虫态选择38
• 4.2 不同种群中华按蚊对溴氰菊酯抗性水平和影响因素38-39
• 4.3 不同种群代谢酶活的差异分析39-40
• 4.4 不同种群kdr基因突变差异分析40-42
• 5 结论42-43
• 参考文献43-48
• 附录A 攻读硕士学位期间发表论文及科研情况48-49
• 附录B 生物卫生杀虫剂以及农药名单49-50
• 附录C 缩略词50-51
• 致谢51-52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：1081800