聚乙烯亚胺-蛋白纳米复合体转染蛋白进入骨髓间充质干细胞的应用研究

发布时间：2017-10-25 03:38

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【摘要】：目的:探索纳米材料聚乙烯亚胺(PEI)携载不同分子量的蛋白质转染进人骨髓间充质干细胞(h BMSCs)的作用及优化其最佳配比条件。方法:利用物理化学作用构建6组PEI-DNase I(DNA酶I)复合体,运用激光散射技术初步摸索其最佳摩尔比,用透射电镜直观复原纳米-蛋白复合体外貌;同时,原代分离培养健康人的骨髓间充质干细胞并进行体外扩增,通过构建成功的4组PEI-GFP(绿色荧光蛋白)纳米蛋白复合体对h BMSCs进行转染,共聚焦荧光显微镜下观察荧光表达情况,再通过MTT法检测该复合体对细胞增殖的毒性影响,并用β-半乳糖苷酶实验验证其转入蛋白的活性表现。结果:当PEI与蛋白质的摩尔比为4∶1时,形成的复合体转染效率最高,β-半乳糖苷酶实验细胞染色变蓝。结论:PEI能与蛋白质形成纳米复合体,并能转染多种蛋白质进入人骨髓间充质干细胞,所转染的蛋白质分子仍具有活性,为细胞重编程技术提供了新途径。
【作者单位】： 南方医科大学;广东省人民医院/广东省医学科学院 广东省心血管病研究所;广东省人民医院风湿免疫科;
【关键词】： 聚乙烯亚胺 骨髓间充质干细胞 蛋白质转染
【基金】：国家自然科学基金重点资助项目(No.81120108003;No.81330007)
【分类号】：R3411
【正文快照】： 蛋白质转染技术是一门新兴的转染技术,是直接把蛋白质转入活细胞的过程。目标蛋白质一般要在载体的帮助下,与载体形成复合体而被转染进入细胞内。蛋白质转染进入细胞有非常重要的科研价值和应用前景,主要研究有:(1)蛋白质-蛋白质相互作用;(2)细胞内信号传导、细胞周期调控、细

【共引文献】

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1 关秀文;基因和药物共传递体系的制备与研究[D];长春理工大学;2014年

【二级参考文献】

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10 陈，

本文编号：1091931