联合骨形成蛋白-2与成骨细胞诱导骨髓基质细胞成骨分化的实验研究

发布时间：2017-10-29 05:23

  本文关键词：联合骨形成蛋白-2与成骨细胞诱导骨髓基质细胞成骨分化的实验研究

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【摘要】：目的： 探讨并评估骨髓基质细胞（BMSCs）在骨形成蛋白-2（rhBMP-2）和成骨细胞（osteoblasts）分别单独诱导及联合诱导作用下，其骨向分化能力的差别，为组织工程中骨髓基质细胞的成骨分化诱导提供新的思路。 方法： 1、运用全骨髓贴壁法分离培养4w龄SD大鼠的骨髓基质细胞（BMSCs），通过分离、培养、纯化BMSCs，得到纯化的P3代细胞待用。 2、BMSCs的鉴定：通过逐日的形态学观察并记录，采用倒置相差显微镜及透射电子显微镜观察，鉴定是否是骨髓基质细胞； 3、通过改进酶消化法结合反复贴壁法培养1d龄SD乳鼠的成骨细胞。 4、形态学观察结合ALP染色检测手段对成骨细胞进行鉴定。 5、实验分四组：rhBMP-2诱导组、成骨细胞诱导组、rhBMP-2+成骨细胞诱导组、单纯培养液组。将分别于第3、6、9d所取的细胞培养液上清液收集在一起，测定各组第3、6、9d的ALP的含量并进行统计学分析。 结果： 1、运用贴壁生长法的成功培养出BMSCs，形态学观察具有BMSCs的典型形态学特征。 2、通过改进酶消化法结合反复贴壁法成功培养出成骨细胞，形态学观察具有成骨细胞的典型形态学特征，，碱性磷酸酶检测显示为阳性。 3、rhBMP-2诱导组、成骨细胞诱导组、rhBMP-2+成骨细胞诱导组均检测出成骨细胞生成，单纯培养液组未观察到成骨细胞的生成。其中，rhBMP-2+成骨细胞诱导组培养上清液ALP含量明显较另两组大，并具有统计学意义。结论： 结论： 1、rhBMP-2、成骨细胞、rhBMP-2联合成骨细胞均能提供成骨微环境，并在体外诱导BMSCs向成骨细胞分化。 2、rhBMP-2联合成骨细胞对骨髓基质细胞的成骨向分化具有更优的诱导能力。关键词：rhBMP-2；成骨细胞；骨髓基质细胞；联合；骨性分化
【关键词】：rhBMP-2 成骨细胞 骨髓基质细胞 联合 骨性分化
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 主要缩略语中英文对照6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-17
• 1.骨组织工程种子细胞的研究概况11-12
• 2.BMSCS 向成骨细胞定向分化的研究现状12-16
• 3.本课题研究思路的提出16
• 4.具体研究内容16-17
• 实验的主要仪器及试剂17-20
• 实验一 骨髓基质细胞（BMSCS）培养及鉴定20-25
• 1. 研究目的20
• 2. 实验材料20
• 3. 实验方法20-21
• 4. 实验结果21-23
• 5. 讨论23-24
• 6. 结论24-25
• 实验二 成骨细胞分离培养及鉴定25-31
• 1. 研究目的25
• 2. 实验材料25-26
• 3. 实验方法26-27
• 4. 实验结果27-29
• 5. 讨论29-30
• 6. 结论30-31
• 实验三 RHBMP-2、成骨细胞诱导骨髓基质细胞成骨分化及检测31-36
• 1. 研究目的31
• 2. 实验材料31
• 3. 实验方法31-32
• 4. 结果32-33
• 5. 讨论33-35
• 6. 结论35-36
• 参考文献36-39
• 附录39-40
• 致谢40-41
• 综述41-46
• 参考文献46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：1111605