青霉素结合蛋白2a单克隆抗体的研制和初步应用

发布时间：2017-10-31 17:16

  本文关键词：青霉素结合蛋白2a单克隆抗体的研制和初步应用

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【摘要】：目的研制青霉素结合蛋白2a(PBP2a)单克隆抗体(Mc Ab),为建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)免疫层析检测方法提供检测用抗体。方法以基因工程抗原r PBP2a免疫BALb/c小鼠,通过常规小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体,采用免疫印迹技术(Western blotting)分析单克隆抗体特异性。选取敏感、特异的单克隆抗体进行金标记和硝酸纤维膜包被,建立胶体金免疫层析检测方法。结果共获得11株分泌抗r PBP2a的杂交瘤细胞,其中6株分泌的单克隆抗体能够与天然PBP2a呈阳性反应。用其中2株单克隆抗体建立的PBP2a胶体金免疫层析方法,可在5~20 min内完成检测。结论获得了特异性针对PBP2a蛋白的单克隆抗体,并初步建立了检测PBP2a蛋白的胶体金免疫层析检测方法,为临床快速、简便检测产生PBP2a的细菌提供了检测方法。
【作者单位】： 上海交通大学医学院医学检验实验室;上海市普陀区人民医院检验科;
【关键词】： 青霉素结合蛋白a 单克隆抗体 胶体金免疫层析法
【基金】：上海市普陀区科技自主创新资助项目(项目编号:普KW11103)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resist-ant Staphylococcus aureus,MRSA),俗称“超级病菌”,其mec A基因编码青霉素结合蛋白2a(Penicillin-bingding protein 2a,PBP2a)[1]。PBP2a是一种参与细菌细胞壁肽聚糖合成的酶,由668个氨基酸残基组成,相对分子质量为76 000,由于

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本文编号：1122952