人脂肪来源干细胞成软骨分化过程中成软骨相关微小RNA表达的初步研究

发布时间：2017-11-01 08:24

  本文关键词：人脂肪来源干细胞成软骨分化过程中成软骨相关微小RNA表达的初步研究

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【摘要】：目的探讨微小RNA(micro RNA,mi RNA)在人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)诱导成软骨分化过程中的表达规律及其影响软骨分化的可能机制。方法取行抽脂术或其他腹部手术患者自愿捐赠的脂肪组织,分离、培养h ADSCs并鉴定。取第3代细胞成软骨分化,倒置相差显微镜下观察细胞形态,于诱导21 d行阿尔新蓝染色观察软骨形成情况,诱导0、7、14、21 d行ELISA检测成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原蛋白(collagen typeⅡ,Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)、Col10a1以及硫酸软骨素表达。采用基因芯片技术筛选h ADSCs成软骨诱导前及诱导后21 d差异性表达mi RNA,并预测筛选出的mi RNA靶基因。结果实验成功培养h ADSCs,经成软骨诱导培养后,随时间延长可形成软骨球;21 d阿尔新蓝染色呈阳性;h ADSCs成软骨诱导后7、14、21 d,Col2a1、Aggrecan、Col10a1及硫酸软骨素表达水平均较成软骨诱导前h ADSCs显著增高,差异均有统计学意义(P0.05)。基因芯片技术共筛选出11个差异性表达mi RNA,其中7个mi RNA表达上调,4个mi RNA表达下调。筛选出的成软骨相关mi RNAs预测靶基因可能参与了干细胞成软骨分化、增殖、凋亡、细胞周期调控,以及介导细胞内级联反应和自我更新等。结论实验筛选出11个成软骨分化差异性表达超过2倍的mi RNAs,并对其靶基因进行预测,加深了对h ADSCs成软骨分化机制的理解,为定向控制h ADSCs成软骨分化及筛选组织工程改良种子细胞提供了理论依据。
【作者单位】： 中山大学附属第一医院关节外科;
【关键词】： 微小RNA 人脂肪来源干细胞 成软骨分化 基因芯片 靶基因
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81171709;81301558;81371941;81201388) 教育部高等学校博士点基金新教师类资助项目(20130171120074) 广东省自然科学基金博士启动项目(S2013040016269)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： Department of Joint Surgery,First Ai liated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou Guangdong,510080,P.R.China.软骨组织工程研究中,种子细胞的选择是关键。自体软骨细胞具有供区有限、体外培养传代去分化,以及随年龄增长细胞数量和质量下降等缺陷。而脂肪组织具

【共引文献】

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本文编号：1126002