白藜芦醇诱导大鼠骨髓基质细胞的神经元样细胞分化及其机制研究

发布时间：2017-11-01 23:28

  本文关键词：白藜芦醇诱导大鼠骨髓基质细胞的神经元样细胞分化及其机制研究

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【摘要】：目的:研究白藜芦醇体外诱导大鼠骨髓基质细胞(Marrowstroma cells，MSCS)的神经元样细胞分化及其可能的机制。 方法：采用全骨髓贴壁法分离培养MSCS；用含白藜芦醇的无血清DMEM/F12诱导MSCS分化。倒置显微镜下观察细胞形态，扫描电镜检测细胞表面的初级纤毛，免疫荧光法、免疫印迹法检测nestin、NSE、MAP-2、GFAP、Ac-Tu、Ptc1、Smo和Gli1的表达。 结果：1.白藜芦醇诱导后细胞胞体收缩，伸出长突起，类似神经元。免疫荧光显示MSCs及对照组细胞表达神经元NSE蛋白，诱导后细胞NSE、MAP-2蛋白阳性，但诱导前后细胞始终未表达胶质细胞GFAP蛋白。免疫印迹显示MSCs及对照组细胞轻度表达nestin、NSE蛋白，随着诱导时间延长，nestin的表达渐减弱，NSE和MAP-2的表达渐增强，但诱导前后细胞始终未表达胶质细胞GFAP蛋白。 2.正常培养的MSCs不表达初级纤毛。经过预诱导或饥饿处理24h后，MSCs表达初级纤毛、蛋白Ptc1、Smo和Gli1，其中Smo和Gli1位于胞浆，Ptc1位于初级纤毛。白藜芦醇诱导后，Smo从细胞浆进入初级纤毛，Gli1从细胞浆进入细胞核，同时，Smo、Gli1蛋白的表达增加。在正常培养时，，白藜芦醇不能促使Smo移位以及MSCs向神经元样细胞分化。当MSCs表达初级纤毛时，白藜芦醇以及Smo激动剂SAG可使Smo从胞浆进入初级纤毛，同时伴随MSCs向神经元样细胞的分化和蛋白Smo、Gli1的表达增强；加入抑制剂环杷明后，Smo仍主要表达于胞浆，蛋白Smo、Gli1的表达降低，MSCs向神经元样细胞的分化受抑制。 结论：1.白藜芦醇在体外可诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经元样细胞。 2. MSCs表达初级纤毛并存在Shh信号，初级纤毛介导Shh信号调控MSCs的神经元样细胞分化。
【关键词】：白藜芦醇 骨髓基质细胞 神经元样细胞 Shh信号 初级纤毛
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 符号说明5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 白藜芦醇体外诱导大鼠骨髓基质细胞向神经元样细胞的分化13-24
• 1 材料和方法13-19
• 2 结果19-22
• 3 讨论22-24
• 第二部分 初级纤毛介导的 SHH 信号对大鼠骨髓基质细胞神经元样细胞分化的影响24-32
• 1 材料和方法24-27
• 2 结果27-29
• 3 讨论29-32
• 结论32-33
• 参考文献33-36
• 附图36-39
• 文献综述39-49
• 参考文献45-49
• 致谢49-50
• 学习期间发表的论文50-51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 任俊伟;杨琴;范层层;陈娜;;白藜芦醇减轻脑缺血再灌注损伤及其机制[J];第三军医大学学报;2010年24期

2 杨琴;谢鹏;曾志磊;李傲;杨军;李咏梅;;刺五加注射液体外诱导骨髓基质细胞分化为神经元样细胞的机制研究[J];中国中药杂志;2008年15期

本文编号：1129026