Hp感染动物模型的建立及重组Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保护性研究

发布时间：2017-11-02 09:20

  本文关键词：Hp感染动物模型的建立及重组Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保护性研究

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【摘要】：目的： 1.构建幽门螺杆菌感染的SPF级BALB/c小鼠动物模型,为进一步研究幽门螺杆菌的致病机制、防治和疫苗研制提供基础。 2.探讨重组Bb-vacA-hpaA疫苗对感染幽门螺杆菌的SPF级BALB/c小鼠的免疫保护作用。 方法： 1.用幽门螺杆菌标准菌株ATCC43504灌胃感染SPF级BALB/c小鼠,根据胃粘膜组织学检查和快速尿素酶检测确定感染模型的建立。 2.随机将BALB/c小鼠分为四组：疫苗组、Bb组、PBS组和空白对照组。疫苗组用幽门螺杆菌重组Bb-vacA-hpaA疫苗灌胃免疫小鼠；Bb组用Bb菌液灌胃小鼠；PBS组用PBS液灌胃小鼠；空白对照组不作任何处理。4w后除空白组外,其他各组小鼠用幽门螺杆菌标准菌株ATCC43504灌胃攻击。 3.检测幽门螺杆菌攻击后各组以及空白组小鼠胃粘膜内幽门螺杆菌感染情况、胃组织病理切片、血清中幽门螺杆菌相关抗体以及胃粘膜和肠粘液的SIgA抗体水平；攻击前后疫苗组、Bb组和PBS组胃粘膜内IFN-γ和IL-4含量。 4.用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况,并用脾脏、胸腺指数评价幽门螺杆菌重组Bb-vacA-hpaA疫苗对SPF级BALB/c小鼠的免疫功能的增强作用。 结果： 1.通过胃粘膜的HE染色、镀银染色和幽门螺杆菌快速尿素酶试验结果显示：感染组的胃组织切片HE染色可见胃粘膜坏死、脱落、等典型炎性病变；镀银染色后胃粘膜内可见大量的Hp定植。成功建立幽门螺杆菌感染的SPF级BALB/c鼠动物模型。 2.免疫攻击后各组胃组织切片结果显示：疫苗组快速尿素酶检测阴性的小鼠胃组织HE染色后未见典型炎性病变,镀银染色后胃粘膜内未见幽门螺杆菌定植；Bb组和PBS组的小鼠胃组织HE染色后可见胃粘膜坏死、脱落、充血、炎细胞浸润等典型炎性病变,镀银染色后胃粘膜内可见大量的幽门螺杆菌定植。空白组小鼠胃粘膜未见异常。 3. ELISA法检测攻击后各组小鼠胃粘膜组织匀浆上清和血清中幽门螺杆菌相关抗体以及肠粘液的SIgA抗体水平显示：疫苗组的小鼠体内抗体水平和胃黏膜内细胞因子含量显著高于其他各组。 4.MTT法检测表明重组Bb-vacA-hpaA疫苗对幽门螺杆菌抗原刺激的脾细胞增殖水平显著高于未免疫组。 结论： 1.成功建立幽门螺杆菌感染的SPF级BALB/c小鼠动物模型。 2.重组Bb-vacA-hpaA疫苗对幽门螺杆菌感染有一定的免疫保护作用。
【关键词】：幽门螺杆菌 动物模型 疫苗 免疫保护性
【学位授予单位】：大理学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378;R-332;R392
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-13
• 第一部分 Hp感染动物模型的建立13-23
• 引言13-14
• 材料和方法14-19
• 1. 实验材料14
• 2. 实验方法14-19
• 结果19-21
• 讨论21-22
• 小结22-23
• 第二部分 重组幽门螺杆菌Bb-vacA-hpaA候选疫苗的免疫保护性研究23-50
• 引言23-24
• 材料和方法24-39
• 1. 实验材料24-27
• 2. 实验方法27-28
• 3 标本检测28-39
• 4 统计学处理39
• 结果39-48
• 讨论48-49
• 小结49-50
• 全文总结50-52
• 参考文献52-56
• 附录 (攻读硕士期间发表的论文)56-57
• 文献综述57-66
• 参考文献63-66
• 致谢66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 王国富;吴利先;白丽;王晶;郭利军;潘云华;;幽门螺杆菌融合蛋白HCTV的保护性研究[J];中国生物制品学杂志;2007年03期

2 张林,安黎云,王缚鲲,刘艳丽,王宪灵,李玮;应用纯化抗原检测尿液和血清抗幽门螺杆菌抗体的比较[J];实用医技杂志;2004年13期

3 张韶斌;陈斯亮;罗莞超;高映萍;罗秋红;;免疫印迹技术对幽门螺杆菌感染的分型诊断及其临床意义[J];实用医技杂志;2007年32期

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本文编号：1130950