蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒工艺的优化

发布时间：2017-11-04 06:06

  本文关键词：蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒工艺的优化

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【摘要】：目的优化蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒的工艺参数。方法在不同进样量(600、700和800 ml)时,检测经蔗糖密度梯度离心纯化后各紫外检测峰的糖浓度、血凝滴度及卵清蛋白含量,并对血凝滴度大于1∶480的检测峰样品进行蛋白质含量和血凝素含量检测,确定最佳收峰位置、糖度范围及病毒浓缩液进样量;在不同比例的30%和50%的蔗糖溶液、不同离心时间(2、3和4 h)条件下对流感病毒浓缩液进行蔗糖密度梯度离心纯化,检测纯化后的病毒纯化液蛋白质、血凝素及卵清蛋白含量,计算蛋白质含量与血凝素含量比值及血凝素回收率,确定最佳离心时间。结果确定最佳收峰位置为第三峰,糖度范围为30%~50%之间;当病毒浓缩液进样量为600~700 ml时,30%蔗糖溶液进液量为450~550 ml,55%蔗糖溶液进液量为400~500 ml,转速为90 639×g离心3 h后,可获得最佳纯化效果。结论确定了蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒的最佳工艺参数,为进一步提高流感病毒的纯化效果提供了参考。
【作者单位】： 长春生物制品研究所有限责任公司;
【基金】：国家科技重大专项(2012ZX09201301-006) 吉林省医药产业发展专项资金(YYZX201112)
【分类号】：R373.13
【正文快照】： 蔗糖密度梯度离心法能较好地去除样品中的杂 质,回收率较高,蔗糖易溶于水,且对核酸和蛋白质无不良影响[1],是目前流感病毒裂解疫苗、乙型脑炎疫苗[2-3]等生产过程中使用较广泛的纯化工艺,而目前对其工艺参数的研究报道不多。为进一步提高蔗糖密度梯度离心法纯化流感病毒的效

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 张文璇,石慧颖,张晋,丁志芬;应用区带离心法纯化地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗[J];中国生物制品学杂志;2004年03期

2 王辉,李克寒,乔建英,胡文权,张振萍,张宏;流行性感冒病毒灭活疫苗规模化生产工艺的建立[J];微生物学免疫学进展;2002年01期

3 石慧颖,丁志芬,赵敏,庞成华,杨抗抗,李荆;大规模区带离心纯化Vero细胞乙脑疫苗[J];中国病毒学;1998年03期

4 陈萍;王红宁;胡慧琼;黄勇;柳萍;;应用不连续密度梯度离心纯化禽传染性支气管炎冠状病毒[J];中国兽医杂志;2007年07期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 徐守振;尹燕博;王新;;动物疫苗中常用抗原灭活剂的研究进展[J];中国畜牧兽医;2010年09期

2 张文璇,石慧颖,张晋,丁志芬;应用区带离心法纯化地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗[J];中国生物制品学杂志;2004年03期

3 杜丽娟;王世光;张立;陈尔佳;杨U，

本文编号：1138135