人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2017-11-05 05:05

  本文关键词：人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

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【摘要】：目的:构建稳定表达人PD-L1分子的基因转染细胞株,观察其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响。方法:将编码人PD-L1分子的全长c DNA重组入反转录病毒表达载体p EGZ-Term-R,将重组载体p EGZ-Term-R/PD-L1和辅助病毒载体用脂质体法共转染293T细胞,包装具有感染能力的完整病毒;收集含有完整重组反转录病毒的293T细胞培养上清,感染L929细胞,筛选并获得G418抗性的基因转染细胞。采用流式细胞术检测表达PDL1的基因转染细胞,命名为L929/PD-L1。采用PHA活化T细胞系来源的细胞株Jurkat,并将其与丝裂霉素预处理的L929/PD-L1细胞共培养,用细胞计数法观察L929/PD-L1细胞株对活化的Jurkat细胞增殖能力的影响,并检测其凋亡情况。结果:成功获得了稳定表达人PD-L1基因的转染细胞株L929/PD-L1。PHA可诱导Jurkat细胞活化并表达PD-1分子;L929/PD-L1与PHA刺激后的Jurkat细胞共培养,可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。结论:成功构建了稳定表达人PD-L1的细胞株,PD-L1分子抑制活化的Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。
【作者单位】： 苏州大学基础与生物科学学院免疫学系;南京医科大学附属苏州医院消化系疾病与营养研究中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31370887,81373149,31200661) 江苏省自然科学基金资助项目(BK2012621) 苏州市科技发展计划项目(SYS201363)
【分类号】：R392
【正文快照】： 苏苏州215008)PD-L1分子是共刺激分子B7家族成员,人PD-L1基因位于9号染色体,编码由290个氨基酸组成的Ⅰ型跨膜蛋白。PD-L1分子广泛表达于激化T细胞、B细胞、树突状细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞、肝细胞和胰岛细胞等,也表达于诸多肿瘤细胞,如肺癌、肝癌、乳腺癌、鳞状细胞癌及

【共引文献】

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1 Xinguo JIANG;;乳腺癌的免疫调节治疗(英文)[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2014年01期

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1 韩丽娟;PD-Ls及其受体PD-1在结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达及免疫调节功能[D];郑州大学;2014年

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3 孙杰;刘玉华;陈永井;郭静雅;陈昌友;胡玲玲;陈明心;邱玉华;;小鼠CXCR3基因转染细胞株的构建、鉴定及生物学功能研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2010年07期

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7 黄子逸;王雪峰;齐Z，

本文编号：1142704