外周血早晚期内皮祖细胞的生物学特性及鉴定的初步研究

发布时间：2017-11-05 21:24

  本文关键词：外周血早晚期内皮祖细胞的生物学特性及鉴定的初步研究

  更多相关文章： 内皮祖细胞 内皮型一氧化氮合成酶 一氧化氮 细胞鉴定

【摘要】：目的通过人外周血分离培养早晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),比较两类EPCs的特性,以期找到可靠的稳定生物学表征及鉴定方法鉴定EPCs。方法通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,体外种植于内皮细胞全培养基诱导培养,分别于培养4~7 d及2~3周获得早、晚期EPCs。对两类EPCs的细胞形态、增殖能力、细胞表型、细胞因子表达情况、体外成血管能力及一氧化氮(nitric oxide,NO)释放能力进行检测比较,并以成熟人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)作为阳性对照。结果两类EPCs形态不同,早期EPCs形成纺锤样细胞簇,而晚期EPCs呈鹅卵石样外观;晚期EPCs具有高增殖潜能,可在基质胶上形成毛细管状结构,而早期EPCs则不具备该特性;两类EPCs均可摄取乙酰化低密度脂蛋白,并能与荆豆凝集素Ⅰ结合;流式细胞仪检测发现早期EPCs不表达CD34和CD133,但造血干细胞标记CD14和CD45表达却呈阳性,而晚期EPCs对于内皮型表面标记CD31和CD34表现为强阳性,但CD14、CD45、CD133表达则呈阴性。RTPCR分析发现早期EPCs的血管内皮生长因子受体2及血管内皮钙黏蛋白基因的相对表达量显著低于晚期EPCs及HAECs(P0.05),而血管性血友病因子及内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因的相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。细胞因子分泌方面,早期EPCs培养上清液中的VEGF、粒细胞集落刺激因子及IL-8浓度明显高于晚期EPCs(P0.05)。Western blot检测示,两类EPCs均表达eNOS,但培养5周的晚期EPCs的eNOS表达水平高于早期EPCs(P0.05);两种EPCs均可释放NO,但NO产量差异无统计学意义(P0.05)。结论 eNOS的表达及NO释放能力作为内皮细胞的可靠生物学特征可用于EPCs鉴别,多方法联合方式用于鉴定EPCs更为可行。
【作者单位】： 江苏省中医院血管外科;南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科;
【基金】：江苏省干部保健科研项目(BJ14013)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)参与出生后血管发生是血管生物学领域的重大研究发现。EPCs可归巢至血管新生处参与新生内皮化并分化为内皮细胞,其在血管新生、血管修复、肿瘤病理及组织工程等方面有很大应用前景[1-4]。Asahara等[5]于1997年首先在人外周血中

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 Philip V.Peplow;;Growth factor- and cytokine-stimulated endothelial progenitor cells in post-ischemic cerebral neovascularization[J];Neural Regeneration Research;2014年15期

2 佟铸;谷涌泉;张建;李建新;张淑文;汪忠镐;;骨髓刺激对大鼠骨髓源内皮祖细胞的影响[J];中国修复重建外科杂志;2008年10期

3 卢辉俊;冯章启;乔彤;刘晨;顾忠泽;刘长建;;纳米多孔PLLA膜对晚期内皮祖细胞行为的影响[J];中国修复重建外科杂志;2009年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 尹青令;侯宁宁;崔晓栋;张爱华;孙金隆;靖旭;吴海燕;王济潍;成敏;;聚乳酸防粘连膜对晚期内皮祖细胞功能的影响[J];功能材料;2014年03期

2 龚晓明;郑澜;瞿树林;;有氧运动对内皮祖细胞诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响[J];北京体育大学学报;2014年06期

3 刘伟;凌均h，

本文编号：1145966