慢病毒介导的下丘脑中过表达miR-505小鼠模型的构建

发布时间：2017-11-06 21:25

  本文关键词：慢病毒介导的下丘脑中过表达miR-505小鼠模型的构建

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【摘要】：目的:本文用慢病毒定点注射的方法构建了在下丘脑中过表达mi R-505的小鼠模型,并利用荧光原位杂交方法在冰冻切片组织上快速检测mi RNAs,以确认慢病毒载体介导的mi R-505在丘脑中的表达能力。方法:实验小鼠在脑立体定位仪下定位到下丘脑位置,采用原位注射的方式进行慢病毒注射,注射后采用实时荧光定量RCR和应用了LNA探针和TSA系统的FISH(fluorescence in situ hybridization)技术,完成在慢病毒介导的mi R-505过表达老鼠下丘脑区域细胞中的mi R-505检测和示踪。结果:mi R-505慢病毒注射未成年小鼠下丘脑区5、10、20和40天后,均可检测到mi R-505在下丘脑区域的表达,且实验结果表明在慢病毒介导的过表达小鼠下丘脑注射部位,mi R-505表达量有明显的提高。结论:利用慢病毒注射未成年小鼠下丘脑脑区的方法,成功的建立了下丘脑中过表达mi R-505的小鼠模型,使用LNA标记探针的FISH方法探索mi RNA表达规律较稳定,且重复率高。
【作者单位】： 东华大学生物科学与技术研究所;
【基金】：中央高校基本科研业务专项资金(13D110521)
【分类号】：R-332;R338
【正文快照】： Chinese Library Classification(CLC):Q95-3;Q75;Q78 Document code:AArticle ID:1673-6273(2015)31-6005-04前言mi RNAs(Micro RNAs)是真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的天然非编码小RNA,其大小长约20~25个核苷酸[1]。越来越多的证据显示:mi RNAs可以调控大量的蛋

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本文编号：1149450