结核杆菌对感染宿主巨噬细胞应激的调控作用及其机制研究

发布时间：2017-11-07 14:22

  本文关键词：结核杆菌对感染宿主巨噬细胞应激的调控作用及其机制研究

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【摘要】：目的:探讨研究不同毒力的结核分枝杆菌对感染宿主巨噬细胞应激的调控作用及其机制。 方法:1以结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株(简称H37Rv菌株)和卡介苗菌株(简称BCG菌株)分别感染小鼠巨噬细胞(RAW264.7),在感染1、6、12及24小时后,分别采用化学比色法检测各组感染巨噬细胞的超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合酶(NOS)的活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的测定。2采用免疫印迹技术检测各组感染巨噬细胞的Cu/Zn-SOD和iNOS蛋白的表达。3采用RT-PCR方法检测各组感染巨噬细胞的Cu/Zn-SOD和iNOS基因的表达(mRNA水平)。 结果:1采用化学比色法检测各组感染巨噬细胞的SOD和NOS活性及MDA和NO含量的测定:BCG菌株感染RAW264.7后细胞内SOD、NOS活性和NO含量逐渐升高,而MDA含量逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)；H37Rv菌株感染RAW264.7后细胞内SOD、NOS和NO含量逐渐下降,而MDA含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。2采用免疫印迹技术检测各组感染巨噬细胞的Cu/Zn-SOD和iNOS蛋白的表达:BCG菌株感染RAW264.7后细胞内Cu/Zn-SOD表达逐渐升高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)；H37Rv菌株感染RAW264.7后细胞内Cu/Zn-SOD表达逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。空白对照组、BCG菌株组、H37RV菌株组感染RAW264.7后细胞内iNOS蛋白的表达无差异,为了进一步研究不同毒力结核分枝杆菌感染巨噬细胞的iNOS的蛋白表达差异,我们将对iNOS基因表达分析。3采用RT-PCR方法检测各组感染巨噬细胞的iNOS和Cu/Zn-SOD基因的表达(mRNA水平):BCG菌株感染RAW264.7后细胞内Cu/Zn-SOD mRNA和iNOS mRNA水平逐渐升高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)；H37Rv菌株感染RAW264.7后细胞内Cu/Zn-SOD mRNA和iNOS mRNA水平逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。 结论:1结核分枝杆菌感染宿主巨噬细胞导致巨噬细胞应激,感染巨噬细胞的应激与菌株毒力强弱有关。2低毒力的结核分枝杆菌对宿主巨噬细胞应激发挥诱导作用。3高毒力的结核分枝杆菌对宿主巨噬细胞应激发挥抑制作用。
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378.911

【参考文献】

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1 赵保路;黄可泰;;自由基与皮肤老化[J];生命的化学(中国生物化学会通讯);1991年05期

2 杜金芳;曾勇庆;陈伟;崔景香;陈其美;杨伦;胡艳霞;;猪CuZnSOD基因的克隆、表达及功能分析[J];遗传;2010年10期

3 马晓红;张育华;;结核分枝杆菌ESAT6基因的研究进展[J];中国病原生物学杂志;2008年11期

4 陈伟;袁俐;;结核分枝杆菌双组分系统PhoPR的研究进展[J];中国病原生物学杂志;2010年06期

5 姚楠;董江涛;徐芳;田玺泽;吴芳;章乐;张万江;;流式细胞术检测不同毒力结核分枝杆菌感染巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化[J];中国病原生物学杂志;2012年02期

6 刘丹霞;张万江;;结核分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用研究概述[J];中国病原生物学杂志;2012年03期

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本文编号：1152794