S-腺苷蛋氨酸大鼠体内药代动力学及其肝肠首过代谢定量评价

发布时间：2017-11-13 12:10

本文关键词：S-腺苷蛋氨酸大鼠体内药代动力学及其肝肠首过代谢定量评价

【摘要】：目的肠道代谢能力在研发及制备口服生物制剂及新药筛选中的作用日益受到人们的重视和关注。本实验拟建立SAMe的大鼠血浆样品HPLC-UV测定方法，并且通过IVAP模型研究SAMe肠道代谢过程，通过十二指肠、门静脉及外周静脉三种不同途径分别给予不同剂量SAMe，定量评价SAMe肝脏和肠道首过代谢程度，并以CYP3A4及P-gp特异性抑制剂酮康唑及维拉帕米为工具药，初步探讨肠道CYP3A4及P-gp在SAMe肠道首过代谢中部分机制，为提高SAMe口服生物利用度提供实验依据。方法建立IVAP大鼠模型，经外周静脉(70mg·kg~(-1),140mg·kg~(-1),280mg·kg~(-1)）、门静脉(70mg·kg~(-1),140mg·kg~(-1),280mg·kg~(-1)）或十二指肠(140mg·kg~(-1),280mg·kg~(-1),560mg·kg~(-1)）三种途径给予高、中、低浓度的SAMe，分别于给药前及给药后0,1,10,20,30,40,60,90,120,180min经大鼠颈动脉取血0.3mL，置肝素化试管中，10000r/min离心3min，分离血浆，-20℃保存待测，血浆样品经处理后，HPLC-UV法测定血浆样品中SAMe的浓度，采用DAS2.0药动学软件分析处理数据，确定药动学参数，定量分析大鼠肝肠首过效应；并采取平行对照试验，经十二指肠给予CYP3A4特异性抑制剂酮康唑(60mg·kg~(-1))以及P-gp特异性抑制剂维拉帕米(9mg·kg~(-1))，比较酮康唑及维拉帕米对十二指肠（280mg·kg~(-1)）及外周静脉（140mg·kg~(-1)）两种给药途径下SAMe药代动力学影响。结果HPLC-UV法检测大鼠血药浓度，该方法专属性好，灵敏度高，可靠性强，SAMe能完全分离，线性范围：10～2000μg·mL~(-1)，回归方程为Y=30241X+256204,r=0.9991，日内精密度RSD分别为2.6%,3.6%,3.9%；日间精密度RSD分别为6.3%,4.9%,7.9%；回收率分别为107%,101%,98.3%。 IVAP模型中，SAMe经不同途径给药后的药动学参数AUC随剂量呈比例关系增加，十二指肠给予三种不同剂量(140mg·kg~(-1),280mg·kg~(-1),560mg·kg~(-1)）的SAMe，均在10min内达峰浓度，AUCid值分别为68.60±19.54mg·L-1·h，151.99±35.91mg·L-1·h，449.19±27.53mg·L-1·h，各剂量间的AUCid及Cmax均随剂量的增加而增加，而其各剂量间Tmax，T1/2及CL值均无显著性差异；门静脉给予(70mg·kg~(-1),140mg·kg~(-1),280mg·kg~(-1)）SAMe后，AUCipv值分别为161.10±29.51mg·L-1·h，457.86±106.83mg·L-1·h，766.82±151.73mg·L-1·h，其AUC随剂量的增加而的增加，而其各剂量间T1/2及CL值均无显著性差异；外周静脉给药剂量同门静脉，其AUCiv值分别为197.09±74.03mg·L-1·h，577.25±161.61mg·L-1·h，939.10±164.43mg·L-1·h，，其AUC随剂量的增加而增加，而T1/2及CL值均无显著性差异。外周静脉及门静脉给药后，其AUCiv及AUCipv均随剂量的增加而增加，但与同剂量的十二指肠给药后AUCid比较，AUCid明显低于AUCiv及AUCipv。经十二指肠预先给予酮康唑及维拉帕米预处理后，显著增加id途径下SAMe的AUC和Cmax值，但对SAMe静脉药动学参数无显著性影响。经十二指肠给予（140、280mg·kg~(-1)）后，其绝对生物利用度分别为10.16±2.07%，17.77±5.41%；肝脏摄取率（EH）分别为18.73±2.42%，12.25±2.85%；肠道摄取率（EI）分别为84.82±3.74%，79.86±5.53%。结论1.本实验方法在该线性范围内专属性好，灵敏度高，可靠性强，可用于SAMe药动学分析。 2.肠道、门脉及外周静脉给予不同剂量SAMe，均经历了肝脏和肠道的代谢作用，经门脉及外周静脉给药后，体内SAMe含量均随给药剂量提高呈显著的增加趋势，但经十二指肠给药后增加趋势低于门脉及外周静脉。 3.肠道CYP3A4和P-gp介导的转运过程均参与SAMe肠道首过代谢过程，抑制肠道CYP3A4和P-gp的功能可以显著增加SAMe的口服生物利用度。 4.肝脏和肠道的代谢均是导致SAMe口服生物利用度低的重要原因,但二者影响程度上存在差异，肠道代谢作用强于肝脏代谢作用。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R969.1

【参考文献】

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