不同发育期鼠胚胎及多种动物胚胎提取蛋白诱导Hela细胞凋亡的差异化比较研究

发布时间：2017-11-16 11:43

  本文关键词：不同发育期鼠胚胎及多种动物胚胎提取蛋白诱导Hela细胞凋亡的差异化比较研究

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【摘要】：从发育生物学的角度来看,肿瘤起源于机体的正常干细胞,肿瘤是细胞异常分化现象,肿瘤是应该发生凋亡而未凋亡的一群细胞。因此,从发育的角度入手可以从根本上攻克肿瘤。在胚胎发育过程中,胚胎本身能够合成促分化因子(例如Nodal蛋白)引导胚胎细胞分化为正常的细胞。研究表明,这些促分化因子也能够诱导肿瘤细胞分化和凋亡。 研究表明,动物细胞中提取的一些蛋白质能够诱导肿瘤细胞分化和凋亡。其他实验室及本实验室大量研究表明,胚胎提取液对诱导肿瘤细胞凋亡具有普遍性。本实验室猜想并证明：发挥诱导作用的是胚胎提取液中的蛋白质。这种胚胎粗提蛋白具有绿色、高效等优点,然而它也具有成分复杂、用量大等缺点。 本实验室通过鸡胚提取蛋白、蟾蜍胚胎提取蛋白诱导肿瘤细胞凋亡证明了：随着胚胎发育,胚胎合成的促分化因子会逐渐降低。本实验用鼠胚胎提取蛋白作为诱导剂,进一步探究该结论。选取发育期为5天、10天、15天、20天的鼠胚胎,4日龄鼠和成体鼠器官分别提取蛋白质。蛋白浓度分别设置为2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL。这些蛋白质诱导Hela细胞凋亡时发现,随着胚胎发育,胚胎提取蛋白的诱导效果逐渐降低。 蛋白质的分离在整个生物学界都是一个难题。为了提高诱导肿瘤细胞凋亡的效率,本实验筛选出较高效的胚胎提取蛋白；探究两种胚胎提取蛋白发挥协同作用共同诱导Hela细胞凋亡。用苍蝇胚胎、牛蛙胚胎、孔雀鱼胚胎、蟾蜍胚胎的提取蛋白作为诱导剂。将苍蝇胚胎提取蛋白浓度设置为1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL,分别进行多次重复诱导实验。其他胚胎提取蛋白进行同样的实验。用光学显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪等检测手段检测肿瘤细胞凋亡率。结果发现苍蝇胚胎提取蛋白的效率最高,其他顺次降低。这四种蛋白两两组合的混合蛋白(各1mg/mL,共2mg/mL)与四种蛋白(1mg/mL)单独诱导效果相比,不具有优势。它们与浓度为2mg/mL的胚胎提取蛋白单独诱导效果相比,差别巨大。这说明现它们之间没有协同性。
【学位授予单位】：东北师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R321

【参考文献】

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本文编号：1192172