单纯疱疹病毒Ⅰ型的Th细胞和B细胞表位重组核酸疫苗的构建及真核表达

发布时间：2017-11-17 01:24

  本文关键词：单纯疱疹病毒Ⅰ型的Th细胞和B细胞表位重组核酸疫苗的构建及真核表达

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【摘要】：目的构建单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)糖蛋白B(g B)和糖蛋白D(g D)的Th细胞和B细胞表位重组串联核酸疫苗,并鉴定其真核表达。方法利用生物信息学分析软件预测HSV-1 g B和g D的Th细胞表位和B细胞表位,结合已发表文献,设计合成HSV-1的Th细胞和B细胞表位重组串联抗原基因(Th/B基因)。将Th/B基因定向克隆入真核表达载体p VAX1,构建真核表达质粒p VAX1-Th/B。用制备的质粒转染COS-7细胞,裂解细胞后经Western blot鉴定其蛋白表达。结果预测得到了HSV-1 g B和g D的Th细胞和B细胞表位,成功构建真核表达质粒p VAX1-Th/B,经测序确认序列正确。SDS-PAGE分离出相应大小的蛋白表达片段,经Western blot鉴定并证实该重组核酸疫苗能够在体外真核细胞中表达。结论成功构建HSV-1 Th细胞和B细胞表位重组串联核酸疫苗,并能够在体外真核细胞中表达,为HSV-1核酸疫苗的进一步研究打下基础。
【作者单位】： 中国医科大学附属第一医院眼科;华北理工大学附属医院神经内科重症病房;
【基金】：国家自然科学基金(81200656) 辽宁省博士启动基金(20111097)
【分类号】：R392
【正文快照】： 单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virusⅠ,HSV-1)是一个嗜神经的双链DNA病毒,可以终身潜伏性感染神经元和胶质细胞。HSV-1感染宿主后引起角膜免疫病理反应并发生单纯疱疹病毒性角膜炎,感染的HSV-1长期潜伏在三叉神经节内,导致角膜反复感染而最终导致失明,是一种严重的致盲性

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